[發明專利]豬囊尾蚴病重組基因、疫苗及其制備方法

無效

• 申請號: 200710305254.4
• 申請日: 2007-12-27
• 公開（公告）號: CN101275140A
• 公開（公告）日: 2008-10-01
• 發明（設計）人: 才學鵬;丁軍濤;王穎;陳曉宇;駱學農;鄭亞東;景志忠
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院蘭州獸醫研究所
• 主分類號: C12N15/30
• 分類號: C12N15/30;C12N15/10;C12N15/63;A61K48/00;A61P33/02
• 代理公司: 蘭州振華專利代理有限責任公司
• 代理人: 張晉

1、一種豬帶絳蟲六鉤蚴重組基因，其特征是將豬帶絳蟲六鉤蚴TsoL18基因原始序列中的第1至第48位堿基(信號肽)全部去除，并將所?；蛐蛄兄械牡?2位堿基a突變為t、第333位堿基a突變為c、第335位堿基a突變為c、第336位堿基a突變為t。

2、權利要求1所述的豬帶絳蟲六鉤蚴重組基因的制備方法，其特征是以提取的豬帶絳蟲六鉤蚴RNA為目的物，根據所用的模板設計上、下游引物，采用反轉錄-聚合酶鏈式反應(RT-PCR)制備重組基因。

3、根據權利要求2所述的豬帶絳蟲六鉤蚴重組基因的制備方法，其特征是取豬帶絳蟲末端成熟的孕卵節片，從中取出孵化和激活的六鉤蚴，再提取六鉤蚴的總RNA，以六鉤蚴的總RNA為模板進行RT-PCR，采用的上、下游引物分別是：

上游引物P1：5’-ccggaattcgcagcggtgaccgtacattcgg-3’

下游引物P2：5’-acgcgtcgacctacgaacggcggaccttcttgt-3’

4、權利要求1所述的豬帶絳蟲六鉤蚴重組基因用于制備防治豬囊蟲病的藥物。

5、權利要求1所述的豬帶絳蟲六鉤蚴重組基因用于制備防治豬囊蟲病的疫苗。

6、一種由權利要求1所述的豬帶絳蟲六鉤蚴重組基因制備的防治豬囊蟲病的疫苗，其特征是該疫苗以減毒鼠傷寒沙門氏菌為載體，重組減毒鼠傷寒沙門氏菌攜帶有豬帶絳蟲六鉤蚴TsoL18重組基因，該基因能夠在減毒鼠傷寒沙門氏菌內和/或沙門氏菌寄生的免疫效應細胞內表達。

7、權利要求6所述的防治豬囊蟲病的疫苗制備方法，其特征是將權利要求1所述的豬帶絳蟲六鉤蚴重組基因與沙門氏菌表達載體pYA3342連接構建重組表達載體pYA3342-TsoL18，電轉化大腸桿菌X6212，得到X6212(pYA3342-TsoL18)，從其提取重組質粒，CaCl₂法轉化沙門氏菌中間宿主X3730，使重組質粒獲得鼠傷寒沙門氏菌的甲基化模式，再從X3730菌中分離重組質粒，電轉化終末宿主疫苗株X4550，得到重組菌X4550(pYA3342-TsoL18)。