[發明專利]一種用于篩選抗糖尿病藥物的細胞模型

無效

• 申請號: 200710203168.2
• 申請日: 2007-12-18
• 公開（公告）號: CN101200707A
• 公開（公告）日: 2008-06-18
• 發明（設計）人: 陳祥貴;楊瀟;戴清源
• 申請（專利權）人: 西華大學
• 主分類號: C12N5/16
• 分類號: C12N5/16;C12Q1/68;G01N33/68
• 代理公司: 成都虹橋專利事務所
• 代理人: 馬昌軍

1.一種篩選抗糖尿病藥物的細胞模型，其特征在于：所述細胞模型是克隆了IR基因的編碼序列、STAT5B基因的編碼序列、以及由STAT5B應答元件調控的報告基因的編碼序列的哺乳動物細胞。

2.根據權利要求1所述的用于篩選抗糖尿病藥物的細胞模型，其特征在于：所述的IR基因的編碼序列、STAT5B基因的編碼序列和由STAT5B應答元件調控的的編碼序列能穩定表達。

3.根據權利要求1所述的用于篩選抗糖尿病藥物的細胞模型，其特征在于：所述的哺乳動物細胞為HepG2、293T、3T3-L1或CHO中的任一種。

4.根據權利要求1所述的篩選抗糖尿病藥物的細胞模型，其特征在于：所述的STAT5B應答元件的序列為TGTGGACTTCTTGGAATTAAGGGACTTTTG。

5.根據權利要求4所述的篩選抗糖尿病藥物的細胞模型，其特征在于：所述報告基因由210個STAT5B應答元件串連或重復的DNA調控序列調控。

6.根據權利要求1所述的用于篩選抗糖尿病藥物的細胞模型，其特征在于：所述報告基因為LUC基因、CAT基因或GFP基因中的任一種。

7.一種制備權利要求1-6任一項所述的篩選抗糖尿病藥物的細胞模型的方法，其特征在于包括以下步驟：將哺乳動物細胞培養至對數生長期后，將分別裝載有IR基因的編碼序列、STAT5B基因的編碼序列、2-10個串聯的STAT5B應答元件DNA序列調控的報告基因編碼序列的表達載體共轉染哺乳動物細胞，經穩定篩選后得到本細胞模型。

8.一種抗糖尿病藥物的篩選方法，其特征在于包括以下步驟：

a、取權利要求1-6任一項所述的用于篩選抗糖尿病藥物的細胞模型接種于培養板并分組，加入含待篩選物質的無血清培養基的為篩選組、加入含胰島素的無血清培養基的為陽性對照、加入無血清培養基的為陰性對照；

b、誘導培養各細胞組，測定報告基因的表達量；根據表達量的多少確定待篩選物質是否被篩出。

9.根據權利要求8所述的抗糖尿病藥物篩選方法，其特征在于所述報告基因的表達量為報告基因所表達的蛋白質或酶的量。