[發明專利]一種含有丹參的藥物制劑的鞣質的檢測分析方法

無效

• 申請號: 200710176035.0
• 申請日: 2007-10-18
• 公開（公告）號: CN101140269A
• 公開（公告）日: 2008-03-12
• 發明（設計）人: 顧群;米長江;阮愛華;姜威
• 申請（專利權）人: 北京本草天源藥物研究院
• 主分類號: G01N30/50
• 分類號: G01N30/50;G01N30/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及中藥領域，具體涉及一種含有丹參的藥物制劑的鞣質的檢測分析方法。

本發明含有丹參的藥物制劑包括以丹參單味藥制備的藥物制劑，比如丹參注射液等制劑。

背景技術

鞣質(tannins)又稱單寧，是存在于植物體內的一類結構比較復雜的多元酚類化合物。鞣質廣泛存在于植物界，約70％以上的生藥中含有鞣質類化合物，尤以在裸子植物及雙子葉植物的楊柳科、山毛櫸科、蓼科、薔薇科、豆科、桃金娘科和茜草科中為多。鞣質存在于植物的皮、木、葉、根、果實等部位，樹皮中尤為常見，某些蟲癭(galls)中含量特別多，如五倍子所含鞣質的量可高達70％以上。在正常生活的細胞中，鞣質僅存在于液泡中，不與原生質接觸，大多呈游離狀態存在，部分與其它物質(如生物堿類)結合而存在；鞣質具收斂性，內服可用于治療胃腸道出血，潰瘍和水瀉等癥；外用于創傷、灼傷，可使創傷后滲出物中蛋白質凝固，形成痂膜，可減少分泌和防止感染，鞣質能使創面的微血管收縮，有局部止血作用，鞣質能凝固微生物體內的原生質，故有抑菌作用，有些鞣質具抗病毒作用，如貫眾能抑制多種流感病毒。鞣質可用作生物堿及某些重金屬中毒時的解毒劑。鞣質具較強的還原性，可清除生物體內的超氧自由基，延緩衰老。此外，鞣質還有抗變態反應、抗炎、驅蟲、降血壓等作用。

鞣質雖然具有一定的藥理作用，但由于其分子量較大、分子量不等，結構復雜，在水或乙醇中成膠體溶液，能夠與蛋白質結合，生成不溶于水的沉淀，因此，在中藥有些制劑中(水針劑、輸液劑、粉針劑、滴眼劑等)，必須設法除盡，主要原因是鞣質能夠產生很大的副作用，比如疼痛等(分析其原因，當含有鞣質制劑與肌肉接觸后，鞣質與組織中的蛋白質結合成不溶性的鞣質蛋白，鞣質蛋白難于被吸收，因此造成疼痛、紅腫及硬結等現象發生)。綜上所述，建立準確、有效的鞣質的檢測方法是非常必要的。

丹參為常用活血中藥，臨床上應用于心絞痛、冠心病等心血管疾病的治療，試驗證實丹參水溶性有效成分為其主要活性成分，其中含有丹酚酸A、B、C、D等13種縮酚酸類成分，丹參縮酚酸類成分均由丹參素與咖啡酸的衍生物聚合或酯化而成，為鄰苯二羥基化合物，與鞣質的結構相似，與蛋清及明膠發生結合，使檢查結果呈陽性，因此目前常規的檢查方法：比如藥典收載的鞣質檢查方法、明膠氯化鈉試液法、紙層析法、透析法、葡聚糖凝膠法等，都不適合于含丹參的制劑的鞣質的檢測分析。所以，建立一種新的檢測含丹參的藥物制劑的鞣質的檢測方法，是十分重要的。

發明內容

基于上述原因，我們科研人員經過長時間的創造性勞動，針對丹參中的鞣質和有效成分進行深入的分析，通過系列的勞動建立一種全新的檢測鞣質的方法：鞣質均由多分子沒食子酸縮合而成，經水解后可生成沒食子酸，而丹參酚酸分子中不含沒食子酸單元結構，經水解后無法生成沒食子酸。因此設計試驗，將丹酚酸A樣品水解，檢測樣品經水解后產生的沒食子酸的含量。若樣品中不含鞣質，則無沒食子酸的色譜斑點(或峰)出現，若有鞣質則樣品經過水解將產生沒食子酸的色譜斑點(或峰)，經過檢測沒食子酸的含量，即可達到測定樣品中鞣質的含量的目的。本申請的鞣質的檢測方法，比現有技術的檢測分析方法靈敏度要高。

本申請通過以下技術方案實現的。

根據以上分析，設計了以沒食子酸為對照，采用高效液相色譜法，以磷酸溶液和乙腈為流動相，對含有丹參的藥物制劑進行制劑鞣質的檢測分析。

其中含有丹參的藥物制劑包括以丹參單味藥制備的藥物制劑。

其中磷酸溶液是磷酸與水體積比為1∶10000-4∶10000的溶液。

其中磷酸溶液是磷酸與水體積比為2.5∶10000的溶液。

其中檢測分析方法為：

照中國藥典2005年版一部附錄VID高效液相色譜法測定，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，ODS預柱，柱溫35℃，檢測波長為273nm，流動相為：0-10分鐘，磷酸溶液比例為95％，乙腈比例為5％；

供試品水解溶液的制備：取樣品，加入鹽酸溶液，水浴中加熱水解，放冷，水解液用濾紙濾過，濾液全部移入量瓶中，具塞錐形瓶及濾紙上的殘渣用甲醇反復洗滌，洗滌液并入量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取續濾液置量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，作為供試品水解溶液；

沒食子酸對照品溶液的制備：取沒食子酸對照品，加甲醇制成溶液，搖勻，濾過，作為沒食子酸對照品溶液；

精密吸取以上各溶液注入液相色譜儀，記錄色譜圖。