[發(fā)明專利]替考拉寧的提純方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710166015.5
• 申請(qǐng)日: 2007-10-31
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101423547A
• 公開(kāi)（公告）日: 2009-05-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 盧偉良;王小勇;章槐東;孫新強(qiáng)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江醫(yī)藥股份有限公司新昌制藥廠
• 主分類號(hào): C07K9/00
• 分類號(hào): C07K9/00;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/16
• 代理公司: 北京乾誠(chéng)五洲知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司
• 代理人: 付曉青;李廣文

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種分離糖肽類抗生素替考拉寧的提純方法，具體地 說(shuō)，涉及一種從2～20W/V％的替考拉寧水溶液中分離替考拉寧的提 純方法。

背景技術(shù)

現(xiàn)今存在的關(guān)于替考拉寧制備的工藝專利中，制備工藝主要為發(fā) 酵液經(jīng)堿化后過(guò)濾，濾液經(jīng)樹脂吸附后，用解吸劑將對(duì)樹脂進(jìn)行解吸， 解吸液經(jīng)過(guò)活性炭脫色，濾液加溶劑沉淀，過(guò)濾即得替考拉寧濕品。 然后用樹脂或?qū)游鰟┻M(jìn)行進(jìn)一步精制，其中的樹脂主要為大孔吸附樹 脂，解吸劑為有機(jī)溶劑的水溶液，最后加大量的溶劑進(jìn)行沉淀。

以上的方法在具體的生產(chǎn)中已經(jīng)得到充分的應(yīng)用，證明效果也不 錯(cuò)。但其中最大的問(wèn)題就是最后的沉淀這一步需要用到大量的有機(jī)溶 劑，這樣會(huì)大大地加重環(huán)保的壓力，同時(shí)因?yàn)槿コs質(zhì)的工序較多， 收率低。如果能將這種沉淀方法改變一下，不使用有機(jī)溶劑或減少有 機(jī)溶劑的使用，能使產(chǎn)品收率和質(zhì)量同時(shí)提高，那不但能降低產(chǎn)品的 原料成本，也能減少環(huán)境污染，從而企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益都會(huì) 得到很大的提高。

通常來(lái)說(shuō)，物質(zhì)能從溶液中結(jié)晶出來(lái)，根本原因就是其在溶液中 的溶解度變小了。而要改變其溶解度，方法一般有改變溫度、調(diào)節(jié) pH值、加鹽、加有機(jī)溶劑等幾種，其中加有機(jī)溶劑這種方法由于要 使用到大量的有機(jī)溶劑，會(huì)加大對(duì)環(huán)保的壓力，所以現(xiàn)不予考慮。另 外替考拉寧的溶解度隨著溫度的變化而變化幅度不是很大，所以如果 要通過(guò)改變溫度使其結(jié)晶出來(lái)很難。而本發(fā)明選擇了調(diào)節(jié)pH和加鹽 這兩種方式。

發(fā)明內(nèi)容

因此，本發(fā)明提供了一種從2～20W/V％的替考拉寧水溶液中分 離替考拉寧的提純方法。

根據(jù)本發(fā)明的一方面，一種分離替考拉寧的提純方法，包括將 2～20W/V％的替考拉寧水溶液用鹽酸溶液調(diào)節(jié)pH＝2.5～6.0。

其中，上述2～20W/V％的替考拉寧水溶液通過(guò)如下步驟制得：

(1)替考拉寧發(fā)酵液在堿性條件下用過(guò)濾器過(guò)濾，得到濾液；

(2)濾液通過(guò)大孔樹脂進(jìn)行柱層析，分別用水洗、甲醇或丙酮 有機(jī)溶劑的酸性水溶液進(jìn)行洗脫，得到洗脫液；

(3)洗脫液通過(guò)活性炭脫色、過(guò)濾，得到脫色濾液；

(4)在pH＝7.0～11.0下通過(guò)分子量為200Da～1000Da納濾膜或 5000Da～30000Da的超濾膜濃縮，并不斷加入去離子水去除有機(jī)溶劑， 制得2～20W/V％的替考拉寧水溶液。

最好，2～20W/V％的替考拉寧水溶液通過(guò)1μm的濾芯過(guò)濾。

最好，在溫度為5～25℃下，攪拌混合液30～90分鐘，然后靜置 12～36小時(shí)。

最好，過(guò)濾后采用pH＝2.5～6.0、溫度為0～10℃的水頂洗。

最好，所述鹽酸濃度為1M。

根據(jù)本發(fā)明的另一方面，一種分離替考拉寧的方法包括向2～20 W/V％的替考拉寧水溶液中加入5～20W/V％堿金屬無(wú)機(jī)鹽、或堿土 金屬無(wú)機(jī)鹽或銨鹽；待上述鹽溶解后，用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)至 pH＝2.5～11。

其中，2～20W/V％的替考拉寧水溶液通過(guò)如下步驟制得：

(1)替考拉寧發(fā)酵液在堿性條件下用過(guò)濾器過(guò)濾，得到濾液；

(2)濾液通過(guò)大孔樹脂進(jìn)行柱層析，分別用水洗、甲醇或丙酮 有機(jī)溶劑的酸性水溶液進(jìn)行洗脫，得到洗脫液；

(3)洗脫液通過(guò)活性炭脫色、過(guò)濾，得到脫色濾液；

(4)在pH＝7.0～11.0下通過(guò)分子量為200Da～1000Da納濾膜或 5000Da～30000Da的超濾膜濃縮，并不斷加入去離子水去除有機(jī)溶劑， 制得2～20W/V％的替考拉寧水溶液。

最好，2～20W/V％的替考拉寧水溶液通過(guò)1μm的濾芯過(guò)濾。

最好，在溫度為5～25℃下，攪拌混合液30～90分鐘，然后靜置 20～40小時(shí)。

最好，過(guò)濾后采用pH＝2.5～6.0、溫度為0～10℃的水頂洗。

最好，所述堿金屬無(wú)機(jī)鹽包括堿金屬無(wú)機(jī)鹵化物；所述堿土金屬 無(wú)機(jī)鹽包括堿土金屬無(wú)機(jī)鹵化物。

其中，所述堿金屬無(wú)機(jī)鹵化物包括氯化鈉、氯化鉀、氯化鋰、溴 化鈉、溴化鉀、溴化鋰、碘化鈉、碘化鉀。

其中，所述堿土金屬無(wú)機(jī)鹵化物包括氯化鎂、氯化鈣、氯化鋇。