[發(fā)明專利]用于測量磷酸修飾酶活性的測定法無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200710159672.7 | 申請日： | 2007-12-14 |
| 公開（公告）號： | CN101205556A | 公開（公告）日： | 2008-06-25 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 甘清芬 | 申請（專利權(quán)）人： | 弗·哈夫曼－拉羅切有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/42 | 分類號： | C12Q1/42;C12Q1/44;C12Q1/25;C12Q1/48;G01N21/64 |
| 代理公司： | 北京市中咨律師事務(wù)所 | 代理人： | 黃革生;林柏楠 |
| 地址： | 瑞士*** | 國省代碼： | 瑞士;CH |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 用于 測量 磷酸 修飾 活性 測定法 | ||
1.用于測定能夠催化底物磷酸修飾以生成產(chǎn)物的酶的活性的方法，所述方法包括以下步驟：
i)在銦(III)離子或者鋯(IV)離子存在的條件下將底物與酶接觸，其中銦(III)離子或者鋯(IV)離子能夠結(jié)合底物或者產(chǎn)物，但不與兩者都結(jié)合；
ii)檢測銦(III)離子或者鋯(IV)離子和底物或者產(chǎn)物之間的結(jié)合程度；和
iii)將步驟ii)中的結(jié)合程度和酶活性相對應(yīng)；
其中該酶選自激酶、磷酸酶、環(huán)化酶和磷酸二酯酶組成的組。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中底物用熒光部分標(biāo)記，并且其中步驟ii)包括測量可檢測的熒光響應(yīng)，所述熒光響應(yīng)表示銦(III)離子或者鋯(IV)離子和底物或者產(chǎn)物之間的結(jié)合程度。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其中可檢測的熒光響應(yīng)選自熒光強(qiáng)度、熒光猝滅、時(shí)間分辨熒光強(qiáng)度、熒光共振能量轉(zhuǎn)移、時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移和熒光偏振組成的組。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其中可檢測的熒光響應(yīng)是熒光偏振。
5.篩選調(diào)節(jié)酶活性的物質(zhì)的方法，所述酶能夠催化底物磷酸修飾以生成產(chǎn)物，所述方法包括以下步驟：
i)在存在或不存在所述物質(zhì)，以及存在銦(III)離子或者鋯(IV)離子的條件下，將底物與酶接觸，其中銦(III)離子或者鋯(IV)離子可以結(jié)合底物或者產(chǎn)物，但不與兩者都結(jié)合；
ii)檢測銦(III)離子或者鋯(IV)離子和底物或者產(chǎn)物之間的結(jié)合程度；和
iii)確定該物質(zhì)調(diào)節(jié)步驟(ii)中的結(jié)合程度的能力，其與酶活性相對應(yīng)；
其中該酶選自激酶、磷酸酶、環(huán)化酶和磷酸二酯酶組成的組。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其中用熒光部分標(biāo)記底物，并且其中步驟ii)包括測量可檢測的熒光響應(yīng)，所述熒光響應(yīng)表示銦(III)離子或者鋯(IV)離子和底物或者產(chǎn)物之間的結(jié)合程度。
7.如權(quán)利要求6所述的方法，其中可檢測的熒光響應(yīng)選自熒光強(qiáng)度、熒光猝滅、時(shí)間分辨熒光強(qiáng)度、熒光共振能量轉(zhuǎn)移、時(shí)間分辨熒光共振能量轉(zhuǎn)移和熒光偏振組成的組。
8.如權(quán)利要求7所述的方法，其中可檢測的熒光響應(yīng)是熒光偏振。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于弗·哈夫曼－拉羅切有限公司，未經(jīng)弗·哈夫曼－拉羅切有限公司許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/200710159672.7/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
