[發明專利]固定化黑芥子酶及其制備方法無效
| 申請號: | 200710156139.5 | 申請日: | 2007-10-19 |
| 公開(公告)號: | CN101173266A | 公開(公告)日: | 2008-05-07 |
| 發明(設計)人: | 王向陽;施青紅;沈蓮清 | 申請(專利權)人: | 浙江工商大學 |
| 主分類號: | C12N11/04 | 分類號: | C12N11/04;C12N9/14 |
| 代理公司: | 杭州中成專利事務所有限公司 | 代理人: | 馮子玲 |
| 地址: | 310035浙江省杭州市西湖區*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 固定 芥子 及其 制備 方法 | ||
1.固定化黑芥子酶,其特征在于:從十字花科蔬菜種子或植株中分離獲取黑芥子酶,制成2mm~3mm的海藻酸鈣凝膠珠,硬化后用戊二醛交聯。
2.如權利要求1所述固定化黑芥子酶的制備方法,其特征在于以下步驟:
(1)按每克十字花科蔬菜種子粉末加3毫升pH為6.0的磷酸緩沖液計加入磷酸緩沖液,攪拌過濾除雜后,再4℃低溫離心去雜質,獲黑芥子酶液;所述磷酸緩沖液中含5%體積份的甘油,1mM?EDTA,3mM?DTT;
(2)按體積/重量比計在上述酶液中加80%硫酸銨,4℃低溫靜置2小時后,在4℃條件下離心,獲得酶沉淀,4℃下蒸餾水透析2小時,獲得液體酶;
(3)在液體酶中加入海藻酸鈉,添加量為每100毫升酶液加入3.5~4.5毫克海藻酸鈉,35℃~45℃水浴溶解海藻酸鈉,將混合液呈小滴狀滴加到2%~3%氯化鈣水溶液中,形成直徑2mm~3mm的海藻酸鈣凝膠珠;
(4)將海藻酸鈣凝膠珠在3℃~5℃靜置硬化2小時,用蒸餾水洗滌后,取顆粒加入到0.15%~0.3%的戊二醛溶液交聯4小時,再用蒸餾水洗滌,得到固定化黑芥子酶顆粒,在3℃~5℃密封保存。
3.如權利要求2所述固定化黑芥子酶的制備方法,其特征在于:步驟(1)所述十字花科蔬菜種子選用的是西蘭花種子。
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