[發(fā)明專利]一種液體發(fā)酵法同時生產竹紅菌素和竹黃多糖的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710135443.1
• 申請日: 2007-11-11
• 公開（公告）號: CN101186932A
• 公開（公告）日: 2008-05-28
• 發(fā)明（設計）人: 楊海龍;肖彩霞
• 申請（專利權）人: 楊海龍;肖彩霞
• 主分類號: C12P7/26
• 分類號: C12P7/26;C12P19/04;C12R1/01
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所
• 代理人: 曹祖良

1.一種液體發(fā)酵法同時生產竹紅菌素和竹黃多糖的方法，其特征在于包括如下步驟：

(1)搖瓶培養(yǎng)：以保藏編號為CGMCC?No.2201的竹黃菌(Shiraiabambusicola?Henn.)菌株為出發(fā)菌株，將試管斜面菌種接入裝有液體培養(yǎng)基的搖瓶中，裝液系數為0.1～0.25，回旋培養(yǎng)，回旋培養(yǎng)的轉速為150～250轉/分鐘，培養(yǎng)溫度22～27℃，培養(yǎng)時間72～120小時；

(2)搖瓶擴大培養(yǎng)：將搖瓶培養(yǎng)所得培養(yǎng)物移入搖瓶擴大培養(yǎng)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，接種量2～10％(體積百分數)，搖床轉速為150～250轉/分鐘，培養(yǎng)溫度22～27℃，培養(yǎng)時間72～120小時；

(3)發(fā)酵培養(yǎng)：將搖瓶擴大培養(yǎng)所得培養(yǎng)物轉入裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內培養(yǎng)，接種量5～10％(體積百分數)，培養(yǎng)溫度22～27℃，發(fā)酵罐壓力0.05MPa，攪拌轉速100～180轉/分鐘，通風量1：0.3～1v/v/m，培養(yǎng)時間96～150小時；發(fā)酵結束后得到竹黃發(fā)酵液，從所得發(fā)酵液中經分離純化后分別獲得竹紅菌素和竹黃多糖。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，搖瓶培養(yǎng)基、搖瓶擴大培養(yǎng)基、發(fā)酵培養(yǎng)基的組成為，每一升水中含下列成分(單位：克)：碳源20～40，氮源2～4，K₂HPO₄?0.75～2，KCl?0.5～1.0，MgSO₄?0.5～1.0，F(xiàn)eSO₄?0.1～0.5，pH5.5～6.5。

3.如權利要求1和權利要求2所述的方法，其特征在于，搖瓶培養(yǎng)基、搖瓶擴大培養(yǎng)基、發(fā)酵培養(yǎng)基的碳源包括葡萄糖、麥芽糖、蔗糖或土豆汁等；氮源包括酵母膏、蛋白胨、尿素或(NH₄)₂SO₄等。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，所述發(fā)酵液的分離純化步驟包括發(fā)酵液的離心分離，分別獲得上清液和菌體；所得上清液濃縮至1/6～1/12體積，以乙醇沉淀，將沉淀物用水溶解，再經乙醇沉淀、冷凍干燥，得竹黃多糖；所得菌體經細胞破碎、有機溶劑(丙酮、氯仿或乙酸乙酯等)萃取、真空濃縮、再將濃縮液冷凍干燥獲得竹紅菌素。