[發明專利]細胞角蛋白19片段化學發光免疫分析測定試劑盒及其制備方法

無效

• 申請號: 200710121167.3
• 申請日: 2007-08-31
• 公開（公告）號: CN101377501A
• 公開（公告）日: 2009-03-04
• 發明（設計）人: 石根;林金明;王栩;應希堂;胡國茂
• 申請（專利權）人: 北京科美東雅生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/543;G01N21/76;G01N33/574
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1、一種細胞角蛋白19片段化學發光免疫分析測定試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括：

1)細胞角蛋白19片段CYFRA21-1校準品；

2)細胞角蛋白19片段CYFRA21-1單克隆抗體包被的固相載體；

3)酶標記的細胞角蛋白19片段CYFRA21-1單克隆抗體；以及

4)上述酶所作用的化學發光底物。

2、如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述細胞角蛋白19片段CYFRA21-1單克隆抗體優選為BM19.21和/或KS19.1。

3、如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述固相載體為微孔板、塑料珠、塑料管或磁性顆粒。

4、如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述酶為堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶。

5、如權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述化學發光底物為1，2-二氧乙烷類衍生物、魯米諾或異魯米諾。

6、如權利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述1，2-二氧乙烷類衍生物為(金剛烷)-1，2-二氧乙烷、3-(2′-螺旋金剛烷)-4-甲氧基-4-(3″-磷酰氧基)苯基-1，2-二氧乙烷、CSPD或CDP-Star。

7、一種制備權利要求1所述試劑盒的方法，其特征在于包括以下步驟：

1)配制細胞角蛋白19片段CYFRA21-1校準品；

2)以細胞角蛋白19片段CYFRA21-1單克隆抗體包被固相載體；

3)用酶標記細胞角蛋白19片段CYFRA21-1單克隆抗體；

4)分裝上述細胞角蛋白19片段CYFRA21-1校準品、酶標記的細胞角蛋白19片段CYFRA21-1單克隆抗體和該酶所作用的化學發光底物；以及

5)組裝為成品。

8、如權利要求7所述的方法，其特征在于，所述細胞角蛋白19片段CYFRA21-1單克隆抗體優選為BM19.21和/或KS19.1。

9、如權利要求7所述的方法，其特征在于，所述包被固相載體的步驟2)包括以下步驟：

I)包被

采用0.05M?pH值為9.6的碳酸鹽緩沖液或0.046M?pH值為4.6的檸檬酸緩沖液與適當濃度的細胞角蛋白19片段CYFRA21-1單克隆抗體混合制成包被液，并將其負載于固相載體上；

II)用生理鹽水洗滌上述固相載體；以及

III)封閉

配制封閉液，基于1000mL所述封閉液包含0.2g?NaH₂PO₄·2H₂O、2.9gNaH₂PO₄·12H₂O、10g?BSA和1mL生物防腐劑，所述封閉液的pH值為7.0～7.6，然后將所得封閉液負載于上述洗滌后的固相載體上。

10、如權利要求7或9所述的方法，其特征在于，所述固相載體為微孔板、塑料珠、塑料管或磁性顆粒。

11、如權利要求7所述的方法，其特征在于，所述酶為堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶。

12、如權利要求7所述的方法，其特征在于，所述化學發光底物為1，2-二氧乙烷類衍生物、魯米諾或異魯米諾。

13、如權利要求12所述的方法，其特征在于，所述1，2-二氧乙烷類衍生物為(金剛烷)-1，2-二氧乙烷、3-(2′-螺旋金剛烷)-4-甲氧基-4-(3″-磷酰氧基)苯基-1，2-二氧乙烷、CSPD或CDP-Star。