[發明專利]KNSL4的轉移相關基因功能和預測乳腺癌患者預后的標志物用途及其應用方法

無效

• 申請號: 200710111637.8
• 申請日: 2007-06-01
• 公開（公告）號: CN101089198A
• 公開（公告）日: 2007-12-19
• 發明（設計）人: 馮玉梅;李曉青;萬艷芳
• 申請（專利權）人: 天津醫科大學附屬腫瘤醫院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 天津市宗欣專利商標代理有限公司
• 代理人: 董光仁

1.驅動蛋白樣DNA結合蛋白(kinesin-like?DNA?binding?protein，Kid，KIF22，Accession?No.NP_015556)基因(kinesin-like?4，KNSL4，AccessionNo.NM_007317)的轉移相關基因功能。

2.KNSL4基因表達水平預測乳腺癌患者預后的標志物用途，其特征在于：基于KNSL4基因表達水平可以預測乳腺癌患者的預后，KNSL4表達水平高的患者預后好，表達水平低的患者預后差。

3.基于KNSL4基因表達水平預測乳腺癌患者預后的檢測及應用方法，其特征在于：

a.提取腫瘤患者原發癌組織標本的細胞總RNA；以RNA為模板逆轉錄合成cDNA；以cDNA為模板，用KNSL4基因和管家基因的特異性引物和熒光標記探針進行實時定量PCR擴增，計算KNSL4基因mRNA的相對表達量為2^-ΔCt，其中，ΔCt＝Ct_KNSL4-Ct_GAPDH(C_T為實時定量PCR時熒光信號達到設定閾值時所經過的循環數)；

b.根據乳腺癌患者復發轉移陽性病例和復發轉移陰性病例的KNSL4?mRNA表達量，確定預后判斷的臨界值，KNSL4?mRNA表達量高于臨界值的患者預后好，而低于臨界值的患者預后差。

4.根據權利要求3所述的檢測方法，其特征在于以原發癌組織中KNSL4?mRNA表達量為1.40×10^-3作為對腫瘤患者預后判斷的臨界值，高于該臨界值的患者則判斷為預后好，低于該臨界值則判斷為預后差。

5.根據權利要求3所述的檢測方法，其特征在于：

KNSL4基因實時定量RT-PCR的引物和探針序列是：上游引物5’-CAAGGAGGGAGTGGAATG-3’；下游引物5’-GGAGGTGGACGACGAGTAG-3’；特異性熒光標記探針序列：5’(FAM)-GCGGCGATCTCAGGAGCTGGTCGCT-3’(TAMRA)。

6.根據權利要求5所述的檢測方法，其特征在于熒光報告基團還可以是SYBR?Green?I、VIC、TETJOE、NED、TAMRA、Cy3、Cy5、ROX、Texas?Red等熒光染料。