[發明專利]甘露聚糖肽的制備方法

無效

• 申請號: 200710093103.7
• 申請日: 2007-12-04
• 公開（公告）號: CN101186942A
• 公開（公告）日: 2008-05-28
• 發明（設計）人: 馬宏偉;李麗;陳爽;曾康芬;江泉;王君山;艾琳;郭才旺
• 申請（專利權）人: 成都川抗萬樂藥業有限公司
• 主分類號: C12P21/02
• 分類號: C12P21/02;C12R1/46
• 代理公司: 北京同恒源知識產權代理有限公司
• 代理人: 趙榮之

1.一種甘露聚糖肽的制備方法，其特征在于，該制備方法包括如下步驟：

(1)制備發酵產物：α-溶血鏈球菌H₁S-33號菌的深層發酵液，經滅活、濃縮、乙醇沉淀得到含有甘露聚糖肽的發酵產物；

(2)提取、除雜質：發酵產物加3～10倍量(W/V)的純化水，在攪拌下進行提取，然后用三氯乙酸調節pH1.5～3.5，靜置、除去雜質得到清液；

(3)乙醇分級沉淀：將清液在攪拌下加濃度90％以上乙醇至20％～40％乙醇濃度，靜置4～24小時，分離沉淀，得一次沉淀物；清液繼續加濃度90％以上乙醇至50％～80％乙醇濃度，靜置4～24小時，分離沉淀，得二次沉淀物；

(4)一次沉淀物的水解：將一次沉淀物用溶菌酶、淀粉酶和纖維素酶中任意一種或者用鹽酸、磷酸、乙酸和氫氟酸中任意一種進行水解。

2.根據權利要求1所述一種甘露聚糖肽的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中酶水解的步驟如下：一次沉淀物用5～20倍量(W/V)的純化水溶解，調整pH6.0～8.0，按500～100000U/g的量加入所述溶菌酶、淀粉酶和纖維素酶中任意一種，20～60℃保溫4～20小時，加熱至沸，冷卻至室溫，調整pH2.0～3.0，濾過，得甘露聚糖肽水溶液。

3.根據權利要求1所述一種甘露聚糖肽的制備方法，其特征在于，所述步驟(4)中酸水解的步驟如下：一次沉淀物用5～20倍量(W/V)濃度0.5～5％鹽酸、磷酸、乙酸和氫氟酸中任意一種溶液溶解，加熱60～105℃并保溫1～8小時，冷卻，調整pH值中性，得甘露聚糖肽水溶液。

4.根據權利要求1至3任意所述一種甘露聚糖肽的制備方法，其特征在于，將二次沉淀物溶于經過水解的一次沉淀物中，過濾至清，用濃度50～80％乙醇沉淀，靜置、分離沉淀物，干燥。

5.根據權利要求1至3任意所述一種甘露聚糖肽的制備方法，其特征在于，將二次沉淀物溶于經過水解的一次沉淀物中，用5～20倍量(W/V)的蒸餾水溶解，按0.1～5％(重量)的比例加入活性炭，70～100℃保溫10～60分鐘，冷卻、濾過，清液用濃度50～80％乙醇沉淀，靜置、分離沉淀物，干燥。