[發明專利]西尼羅病毒的引物和探針及一步法實時RT－PCR檢測試劑盒有效
| 申請號： | 200710092783.0 | 申請日： | 2007-09-29 |
| 公開（公告）號： | CN101245394A | 公開（公告）日： | 2008-08-20 |
| 發明（設計）人： | 謝鵬;曾志磊;陳曉 | 申請（專利權）人： | 謝鵬;曾志磊 |
| 主分類號： | C12Q1/70 | 分類號： | C12Q1/70;C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 重慶市恒信知識產權代理有限公司 | 代理人： | 劉小紅 |
| 地址： | 400016重慶市渝中區醫學*** | 國省代碼： | 重慶;85 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 西尼羅 病毒 引物 探針 一步法 實時 rt pcr 檢測 試劑盒 | ||
1.一種西尼羅病毒一步法實時RT-PCR檢測試劑盒，其組成包括：One?StepRT-PCR?Master?Mix、標準品RNA、內參RNA、Primer?&?Probe?Mix、逆轉錄酶和水；其中所述的Primer?&?Probe?Mix包括以下針對西尼羅病毒的引物和探針的混合物：
(1)西尼羅病毒的上游引物，其核苷酸序列為SEQ?ID?NO1；
(2)西尼羅病毒的下游引物，其核苷酸序列為SEQ?ID?NO2；
(3)西尼羅病毒的TaqMan探針，其核苷酸序列為SEQ?ID?NO3；
(4)內參RNA的TaqMan探針，其序列為SEQ?ID?NO4。
2.根據權利要求1所述的一種西尼羅病毒一步法實時RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于，所說的One?Step?RT-PCR?Master?Mix為含RT-PCR緩沖液、Mgcl2，dNTPs、DNA聚合酶和無RNA酶水的混合液；其中DNA聚合酶為熱啟動Taq?DNA聚合酶。
3.根據權利要求1所述的一種西尼羅病毒一步法實時RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于，所說的標準品RNA序列為SEQ?ID?NO5。
4.根據權利要求1所述的一種西尼羅病毒一步法實時RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于，所說的內參RNA序列為SEQ?ID?NO6。
5.根據權利要求1所述的一種西尼羅病毒一步法實時RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于，所說的水為無RNA酶水。
6.根據權利要求1所述的一種西尼羅病毒一步法實時RT-PCR檢測試劑盒，其特征在于，試劑盒中各組分的量為：2×One?Step?RT-PCR?Master?Mix1.25ml/管、各濃度梯度的標準品RNA凍干管共6管、內參RNA凍干管1管、5×Primer?&?Probe?Mix1.0ml/管、逆轉錄酶MMLV?80ul/管和無RNA酶水10ml/瓶。
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