[發(fā)明專利]同時(shí)檢測(cè)乙型肝炎病毒基因亞型和耐藥突變的試劑盒及方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710073933.3
• 申請(qǐng)日: 2007-04-06
• 公開（公告）號(hào): CN101092651A
• 公開（公告）日: 2007-12-26
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 田潔;任維;向筑;廖生赟;鄒耀東
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 亞能生物技術(shù)（深圳）有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/70
• 分類號(hào): C12Q1/70;C12Q1/68
• 代理公司: 深圳市博銳專利事務(wù)所
• 代理人: 張明

1.同時(shí)檢測(cè)乙型肝炎病毒基因亞型和耐藥突變的試劑盒，其特征在于所述試劑盒包括：

1)特異性擴(kuò)增乙型肝炎病毒基因或轉(zhuǎn)錄本的引物，其堿基序列如SEQ?ID?NO：1和SEQ?ID?NO：2所示；

2)乙型肝炎病毒基因亞型特異性寡核苷酸探針，其堿基序列如SEQ?ID?NO：3、SEQ?ID?NO：4和SEQ?ID?NO：5所示；

3)乙型肝炎病毒耐藥突變特異性寡核苷酸探針，其堿基序列如SEQ?ID?NO：6、SEQ?ID?NO：7、SEQ?ID?NO：8、SEQ?ID?NO：9、SEQ?IDNO：10、SEQ?ID?NO：11、SEQ?ID?NO：12、SEQ?ID?NO：13、SEQ?ID?NO：14、SEQ?ID?NO：15、SEQ?ID?NO：16和SEQ?ID?NO：17所示；

上述所有序列可由其堿基互補(bǔ)序列替換。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時(shí)檢測(cè)乙型肝炎病毒基因亞型和耐藥突變的試劑盒，其特征在于所述寡核苷酸探針固定在基質(zhì)上。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時(shí)檢測(cè)乙型肝炎病毒基因亞型和耐藥突變的試劑盒，其特征在于所述寡核苷酸探針固定在尼龍膜上。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的同時(shí)檢測(cè)乙型肝炎病毒基因亞型和耐藥突變的試劑盒，其特征在于所述引物標(biāo)記生物素。

5.同時(shí)檢測(cè)乙型肝炎病毒基因亞型和耐藥突變的方法，包括以下步驟：

1)制備血清，提取乙型肝炎病毒DNA；

2)以步驟1)所得DNA為模板，利用權(quán)利要求1所述特異性擴(kuò)增乙型肝炎病毒基因或轉(zhuǎn)錄本的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增；

3)上述PCR產(chǎn)物與固定在基質(zhì)上的權(quán)利要求1所述探針序列雜交；

4)洗膜及顯色。