[發明專利]九孔鮑NF－κB抗體的制備及其檢測方法無效

申請號：	200710070419.4	申請日：	2007-08-03
公開（公告）號：	CN101205254A	公開（公告）日：	2008-06-25
發明（設計）人：	吳信忠;姜玉聲;吳劉記	申請（專利權）人：	浙江大學
主分類號：	C07K16/18	分類號：	C07K16/18;G01N33/53
代理公司：	杭州中成專利事務所有限公司	代理人：	陳禎祥
地址：	310027浙江省杭***	國省代碼：	浙江;33
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摘要：
搜索關鍵詞：	九孔 nf 抗體制備及其檢測方法
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【權利要求書】：

1.九孔鮑NF-κB抗體的制備方法，其特征是包括以下操作步驟：

(1)按克隆出的由SEQNO1和SEQNO2記載的九孔鮑NF-κB基因全長序列設計的用于擴增RHD和TD片段的寡聚核苷酸引物：RHD：pRf：AGGATCCGAACCAGCACCTCAGCAA和pRr：ACTCGAGCGGCATGTAAGTGAACGGAAT；TO：TDf：AGGATCCGCAGCCCACTTTGTTCAG和TDr2：ACTCGAG?CCATGTCGATGGTGTCG；

(2)構建表達載體pGEX-RHD和pGEX-TD，轉化大腸桿菌BL21；

(3)表達載體經谷胱甘肽GST凝膠親和柱純化后，分別注射家兔得到相應的抗九孔鮑NF-κB的RHD和TD的兩個多克隆抗體。

2.由權利要求1制備的RHD和TD兩個多克隆抗體檢測九孔鮑免疫因子的方法，其特征是用RHD和TD兩個多克隆抗體分別對九孔鮑核轉錄因子RHD和TD兩個蛋白活性結構區進行Western蛋白印跡檢測。

3.由權利要求1制備的RHD和TD兩個多克隆抗體檢測九孔鮑免疫因子的方法，其特征是利用雙抗體與二抗聯用間接夾心酶聯免疫反應試驗ELISA檢測九孔鮑核轉錄因子RHD和TD蛋白活性結構區。

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