[發明專利]一種具有與腫瘤細胞特異性結合功能的微膠囊的制備方法

無效

• 申請號: 200710070115.8
• 申請日: 2007-07-20
• 公開（公告）號: CN101099727A
• 公開（公告）日: 2008-01-09
• 發明（設計）人: 高長有;趙慶賀;毛崢偉;沈家驄
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: A61K9/50
• 分類號: A61K9/50;A61K47/32;A61P35/00;B01J13/06
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司
• 代理人: 韓介梅

1.一種具有與腫瘤細胞特異性結合功能的微膠囊的制備方法，其特征是包括以下步驟：

1)在濃度為0.33M/L的含鈣無機鹽水溶液中，攪拌下加入等體積的濃度為0.33M/L的含碳酸根無機鹽水溶液，攪拌下反應15分鐘，離心過濾，得CaCO₃膠體微粒；

或者在濃度為0.005M/L的含鈣無機鹽水溶液中加入聚苯乙烯磺酸鈉，攪拌下加入等體積的濃度為0.005M/L的含碳酸根無機鹽水溶液，聚苯乙烯磺酸鈉的終濃度為0.5mg/mL，攪拌下反應5分鐘，離心過濾，得內部含聚苯乙烯磺酸鈉的CaCO₃膠體微粒；

2)將1mL濃度為1mg/mL的聚烯丙基胺鹽酸鹽的0.5M的NaCl溶液與步驟1)的CaCO₃膠體微粒混和，10分鐘后離心棄上清液，水洗后，得到第一層為聚烯丙基胺鹽酸鹽的CaCO₃膠體微粒；再將該CaCO₃膠體微粒分散在1mL濃度為1mg/mL聚苯乙烯磺酸鈉的0.5M的NaCl溶液中，10分鐘后離心棄上清液，水洗后，得到第二層為聚苯乙烯磺酸鈉的CaCO₃膠體微粒；重復以上過程，并使最外層為聚烯丙基胺鹽酸鹽，得到聚電解質多層膜包裹的核-殼結構微粒；

3)向步驟2)制得的微粒中加入1mL?0.5％戊二醛，室溫下反應12小時，離心，去上清，水洗后；向其中加入1mL?2％的雙端氨基聚乙二醇，室溫下反應24小時，得到聚乙二醇修飾的表面含有氨基的核-殼粒子，離心，去上清，水洗后；加入2mg/mL的NaBH₄溶液，4℃下反應12小時，然后離心，棄去上清，水洗后；加入2.5mM/mL葉酸、20mg/mL?1-乙基-3-(3-二甲氨基-丙基)碳二亞胺和10mg/mL?N-羥基琥珀酰亞胺溶液，室溫下反應24小時；去上清，水洗后，得到葉酸修飾的CaCO₃膠體粒子；

4)采用鹽酸或乙二胺四乙酸絡合去除CaCO₃膠體微粒，得到葉酸修飾的中空微膠囊或內含聚苯乙烯磺酸鈉的微膠囊。

2.根據權利要求1所述的一種具有與腫瘤細胞特異性結合功能的微膠囊的制備方法，其特征是所說的含鈣無機鹽是硝酸鈣或氯化鈣。

3.根據權利要求1所述的一種具有與腫瘤細胞特異性結合功能的微膠囊的制備方法，其特征是所說的含碳酸根無機鹽是碳酸鈉或碳酸氫銨。