[發明專利]從西蘭花籽中分離制備葡萄糖萊菔子苷的方法

無效

• 申請號: 200710069958.6
• 申請日: 2007-07-09
• 公開（公告）號: CN101100475A
• 公開（公告）日: 2008-01-09
• 發明（設計）人: 杜琪珍;崔洪剛;沈蓮清
• 申請（專利權）人: 浙江工商大學
• 主分類號: C07H15/14
• 分類號: C07H15/14;C07H1/08
• 代理公司: 杭州中成專利事務所有限公司
• 代理人: 馮子玲

技術領域

本發明屬于食品加工技術領域，涉及西蘭花籽深加工技術，特別是從西蘭花籽中分離制備葡萄糖萊菔子苷的方法。

技術背景

西蘭花籽是我國的傳統特產蔬菜，其風味獨特，且具有很高的營養保健價值，含有豐富的營養物質和活性物質，硫代葡萄糖苷類化合物是其中最主要的一類活性成分。西蘭花籽硫苷主要成分為葡萄糖萊菔子苷。國內外研究表明葡萄糖萊菔子苷具有抗氧化、抗癌、抗突變等生物活性，并對DNA分裂有保護作用和減輕眼睛的疲勞、提高夜間視力和改善視覺瞬間改變適應性。從西蘭花籽分離制備葡萄糖萊菔子苷未有文獻報道。

現有關于硫代葡萄糖苷的分離主要采用制備型高效液相色譜，其局限性是分離量少。其次，高效液相色譜柱價格昂貴、再生使用相對困難，分離得到硫代葡萄糖苷成本較高，難以發展成為制備量大的分離技術。

發明內容

本發明的目的是提供一種成本較低、經濟適用的從西蘭花籽中分離制備葡萄糖萊菔子苷的方法。

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：采用甲醇浸提西蘭花籽中的硫苷；用萃取法對浸提得到提取物進行初步純化，得到西蘭花籽硫苷粗提物；以逆流色譜儀為分離設備分離純化西蘭花籽花色苷粗提物中的葡萄糖萊菔子苷.，其溶劑系統由常溫常壓下處于液態的乙腈、正丁醇和10％硫酸銨水溶液組成，乙腈、正丁醇和10％硫酸銨的體積比為0.5∶2～4∶1，水的用量應至少保證使溶劑系統上下相分層，硫酸銨水溶液的濃度為10％。下相做固定相，上相做流動相。

以上方案按步驟敘述如下：

1.采用甲醇溶劑浸提西蘭花籽中的葡萄糖萊菔子苷，得到葡萄糖萊菔子苷提取液。

2.將葡萄糖萊菔子苷提取液真空濃縮至含固形物；

3.在上述濃縮液中加入適量的水，用乙酸乙酯萃取兩次，脫脂為水相葡萄糖萊菔子苷；

4.將葡萄糖萊菔子苷水相真空濃縮至糊狀，再冷凍干燥，獲西蘭花籽葡萄糖萊菔子苷粗提物；

5.采用逆流色譜方法分離純化葡萄糖萊菔子苷粗提物；

6.收集逆流色譜分離的葡萄糖萊菔子苷組分進行真空濃縮，直至固形物濃度達到40％以上，

再采用冷凍干燥，得到純化的葡萄糖萊菔子苷粉末，純度達95％以上。

步驟(1)所述的浸提過程是：采用甲醇溶劑，浸提溶劑與西蘭花籽的體積比為5～10∶1，條件為沸水浴，浸提時間為1小時，浸提次數2～3次。

步驟(2)、步驟(4)和步驟(6)所述真空濃縮的真空度低于0.09Mpa，溫度為35～40℃。

步驟(4)和步驟(6)所述冷凍干燥的真空度低于50Pa，溫度低于-35℃。

步驟(5)所述逆流色譜方法為：采用逆流色譜儀為分離設備，溶劑系統由常溫常壓下處于液態的正丁醇、乙腈和10％硫酸銨水溶液組成，乙腈、正丁醇和10％硫酸銨的體積比為0.5∶2～4∶1，水的用量應至少保證使溶劑系統上下相分層，硫酸銨水溶液的濃度為10％，下相做固定相，上相做流動相；用泵將上述溶劑系統的下相注入逆流色譜儀的色譜柱，并取上述溶劑系統的部分上相溶解花色苷粗提物制備逆流色譜樣品溶液；開啟逆流色譜儀和流動相輸液泵，將樣品溶液和流動相輸入逆流色譜分離柱；用紫外-可見檢測器檢測逆流色譜流出液，根據所得的色譜圖收集葡萄糖萊菔子苷組分。

步驟(5)所述逆流色譜方法中的逆流色譜儀為高速逆流色譜儀(HSCCC)或低速逆流色譜儀(SRCCC)。

附圖說明

圖1為本發明的工藝流程圖。

圖2為實施例1的HSCCC分離圖譜。

圖3為實施例1分離所得的葡萄糖萊菔子苷的HPLC圖譜。

圖4為實施例2的HSCCC分離圖譜。

圖5為實施例3的SRCCC分離圖譜。

具體實施方式

實施例1

本實施例的溶劑系統采用乙腈∶正丁醇∶10％硫酸銨水溶液＝0.5∶3∶1，硫酸銨水溶液濃度為10％；逆流色譜儀為HSCCC-D1000高速逆流色譜儀，葡萄糖萊菔子苷粗提物中葡萄糖萊菔子苷約占3.6％。