[發明專利]一種三磷酸胞苷的晶膠吸附層析分離方法

有效

• 申請號: 200710069817.4
• 申請日: 2007-06-29
• 公開（公告）號: CN101085798A
• 公開（公告）日: 2007-12-12
• 發明（設計）人: 沈紹傳;贠軍賢;姚克儉;王良華
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: C07H19/10
• 分類號: C07H19/10;C07H1/06
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司
• 代理人: 黃美娟;袁木棋

1.一種三磷酸胞苷的晶膠吸附層析分離方法，所述方法如下：(1)將含有三磷酸胞苷的混合液調pH為酸性，以0.1～30cm/min流速上超大孔連續床晶膠介質床柱，進行吸附；所述晶膠介質為陰離子交換晶膠介質，所述陰離子交換晶膠介質的孔徑為5～400μm、孔隙率為50～98％、功能基團為胺基或其衍生基團；所述胺基或其衍生基團為下列之一：①-N⁺(CH₃)₃、②-N(CH₃)₂、③-N(C₂H₅)₂；(2)以去離子水或pH值1～6的稀酸溶液為沖洗液沖洗床柱，除去晶膠介質內殘留的混合液；(3)用洗脫液進行洗脫，收集含三磷酸腺苷的洗脫峰，得到所述的三磷酸腺苷，所述的洗脫液為含有0.001～3M堿金屬鹽的稀酸溶液。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(3)中的洗脫為梯度洗脫，洗脫液流速0.1～20cm/min，步驟如下：先用含堿金屬鹽0.001～0.06M、pH?1～6的稀酸溶液I進行洗脫，再用含堿金屬鹽0.1～3M、pH?1～6的稀酸溶液II進行洗脫，收集含三磷酸胞苷的洗脫峰，得到所述的三磷酸胞苷。

3.如權利要求2所述的方法，其特征在于所述稀酸溶液I、稀酸溶液II各自獨立為下列之一：①鹽酸溶液、②硫酸溶液、③乙酸溶液、④檸檬酸溶液。

4.如權利要求2所述的方法，其特征在于所述堿金屬鹽為NaCl或KCl。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中含有三磷酸胞苷的混合液為酵母發酵液。

6.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述方法如下：

(1)將含有三磷酸胞苷的酵母發酵液調pH為2～3，以2～10cm/min流速上超大孔連續床晶膠介質床柱，進行吸附；所述晶膠介質為陰離子交換晶膠介質，所述陰離子交換晶膠介質的孔徑為5～400μm、孔隙率為50～98％、功能基團為下列之一：①-N⁺(CH₃)₃、②-N(CH₃)₂、③-N(C₂H₅)₂；

(2)用沖洗液以2～10cm/min流速沖洗床柱，除去晶膠介質內殘留的混合液；所述沖洗液為下列之一：①去離子水、②pH2～4的鹽酸溶液、③pH2～4的硫酸溶液、④pH2～4的乙酸溶液、⑤pH2～4的檸檬酸溶液；

(3)用洗脫液以2～10cm/min流速進行梯度洗脫：先用含NaCl或KCl0.001～0.06M、pH?1～6的稀酸溶液I進行洗脫，再用含NaCl或KCl?0.1～3M、pH?1～6的稀酸溶液II進行洗脫，收集含三磷酸胞苷的洗脫峰，得到所述的三磷酸胞苷；所述稀酸溶液I、稀酸溶液II各自獨立為下列之一：①鹽酸溶液、②硫酸溶液、③乙酸溶液、④檸檬酸溶液。