[發明專利]微生物檢測質量控制標準物質及其制備方法

無效

• 申請號: 200710069051.X
• 申請日: 2007-06-04
• 公開（公告）號: CN101086008A
• 公開（公告）日: 2007-12-12
• 發明（設計）人: 楊寧敏
• 申請（專利權）人: 杭州致遠醫學檢驗所有限公司
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04;C12Q3/00;C12R1/01;C12R1/645
• 代理公司: 杭州華鼎專利事務所
• 代理人: 胡根良

技術領域

本發明涉及一種用在微生物檢測實驗室作質量控制對照，指示微生物檢測實驗室中檢測質量的，定量的微生物標準物質及其制備方法。

背景技術

產品(食品、飲用水、化妝品、醫療用品、生活用品、衛生用品等)和環境中存在大量的微生物(非致病微生物、致病微生物、條件致病微生物、弱毒性致病微生物和強毒性致病微生物等)，由于產品中存在大量的微生物極大多數是繁殖體(正在大量繁殖的微生物)，產品質量監督監測部門和企業內部的實驗室，進行檢測檢測，檢測的數據只能表示檢測當時的衛生標準。同一產品，不同時間檢測，檢測的微生物數據均為不一致，有時差異會很大。因此，微生物檢測有一個不成文的規定：微生物檢測不復檢。由于沒有一個統一的微生物檢測質量控制標準物質，使各系統、各單位的微生物檢測實驗室對產品等微生物檢測時，沒有標準物質作同步檢測對照，使檢測結果成為不確定性。

為了能證明檢測質量的準確，只有在微生物檢測時，同步進行“微生物檢測質量控制標樣”檢測，當檢測的數據符合標定的“微生物檢測質量控制標準物質”數據時，才能證明本次微生物檢測過程中的各方面的影響因素(技術人員的技能、生物試劑的質量、實驗檢測環境條件等)得到控制，檢測的數據是準確的。同時，每周采用“微生物檢測質量控制標準物質”進行檢測，繪制質量控制曲線圖進行分析、總結，分析微生物檢測實驗室質量保證體系運行情況，提出整改措施。才能保證該微生物檢測實驗室的質量體系正常運行。

發明內容

為提供一種微生物檢測質量的標準物質，本發明提供以下技術方案。

微生物檢測質量控制標準物質的制備方法，包括以下步驟：

a.選擇性狀穩定、形成集落能識別的、容易保存的、對人和動、植物無毒害的微生物，利用芽孢形成培養基或真菌孢子形成培養基制備細菌芽胞或真菌孢子，

b.用滅菌蒸餾水洗下細菌芽孢或真菌孢子，染色，用滅菌蒸餾水稀釋至應用濃度，即內含指示微生物含量為10²～10⁹CFU/0.01G(或片、支、粒)，

c.將定量的己稀釋至應用濃度的細菌芽孢或真菌孢子加入到已經環氧乙烷滅菌處理，并已達到無菌要求的定量載體中，均質，達到定量數值的細菌芽胞或真菌孢子均勻結合在載體上，

d.將滅菌后的吸附有定量數值細菌芽胞或真菌孢子的定量載體置于已經滅菌的尖底2ml具塞塑料管中。

步驟a中優選的微生物為嗜熱脂肪桿菌芽胞、枯草桿菌黑色變種芽胞、短小桿菌芽胞、蠟樣芽胞或白色念珠菌、酵母。

優選步驟a中芽孢形成培養基的配方如下：蛋白胨1.0％、牛肉浸膏粉0.3％、氯化鈉0.5％、葡萄糖0.1％、碳酸氫鈉0.08％、瓊脂粉1.2％。

優選步驟a中真菌孢子形成培養基的配方如下：蛋白胨0.5％、葡萄糖4.0％、玉米淀粉4.0％、吐溫80?0.1％、瓊脂粉1.0％、碳酸氫鈉0.01％。

優選的方案中步驟c中載體可以是不溶性淀粉或可溶性淀粉、磁珠、直徑為1～6mm的塑料圓珠、瓊脂顆粒、明膠片、50％明膠溶液、直徑為6mm的厚濾紙片、葡萄糖、蔗糖、乳糖。

用上述任一種方法制備的微生物檢測質量控制標準物質，其特征在于載體上均勻地分布有細菌芽胞或真菌孢子，載體內含指示微生物含量為10²～10⁹CFU/0.01G(或片、支、粒)。

用上述任一種方法制備的微生物檢測質量控制標準物質，可用于樣品或產品等菌落計數項目檢測過程中同步陽性對照。培養基的質量檢定。滅菌器滅菌工藝制訂及滅菌效果考核、繪制微生物檢測實驗室內質量控制曲線圖及微生物檢測實驗室室內、室間盲樣(技術人員技能)考核。

1、樣品(或產品)等菌落計數項目檢測過程中同步陽性對照。

在每批(每天)進行樣品(產品)等菌落計數檢測時，采用“微生物檢測質量控制標準物質”進行同步檢測，作為陽性對照，判定本次實驗結果是否準確和實驗過程中存在引起誤差的原因。

2、繪制微生物檢測實驗室內質量控制曲線圖。

為了保證微生物實驗室的檢測質量，每周用“微生物檢測質量控制標準物質”進行檢測，將檢測結果標入質量控制圖內，對本微生物檢測實驗室內存在的影響檢測質量的因素進行系統分析，并提出整改意見。

3、用于培養基(營養瓊脂)質量檢定。