[發(fā)明專利]一種建立大鼠乙酸胃潰瘍疾病復發(fā)模型的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710068261.7
• 申請日: 2007-04-28
• 公開（公告）號: CN101069747A
• 公開（公告）日: 2007-11-14
• 發(fā)明（設計）人: 王金福;王國忠
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00;G01N33/48
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司
• 代理人: 張法高;趙杭麗

1.一種建立大鼠乙酸胃潰瘍疾病復發(fā)模型的方法，其特征是通過以下步驟實現(xiàn)：

(1)建立大鼠乙酸胃潰瘍及潰瘍自然愈合模型：用乙醚麻醉大鼠，剖腹后用內(nèi)徑6mm的塑料管置于胃體與幽門交界處，向管內(nèi)注入100％的乙酸75μl，25秒后用棉簽拭去塑料管內(nèi)的乙酸，依次縫合腹壁各層，關閉腹腔，建立大鼠乙酸潰瘍模型，然后定期處死大鼠，于肉眼及顯微鏡下觀察潰瘍形態(tài)及潰瘍自然愈合過程；

(2)用阿司匹林誘導已自然愈合的潰瘍復發(fā)：在所有大鼠乙酸潰瘍制作后第25天開始，每天大鼠禁食4小時后，用灌胃的方法給予大鼠40mg/公斤體重/天的阿司匹林，然后再禁食1小時，直至在第35天、45天和55天后分批處死大鼠，檢測自然愈合后潰瘍的復發(fā)；

(3)通過測定大鼠潰瘍復發(fā)過程中的生理生化指標變化，證實胃潰瘍的復發(fā)：用過量的乙醚麻醉處死大鼠，打開腹腔，收集胃粘膜、胃粘液、血清和血漿，測定胃黏膜前列腺素E₂、胃粘液量、胃黏膜血流、表皮生長因子、轉化生長因子-α、血管內(nèi)皮生長因子、腫瘤壞死因子-α和白細胞介素-1β含量，確定胃潰瘍的復發(fā)。

2.根據(jù)權利要求1所述的一種建立大鼠乙酸胃潰瘍疾病復發(fā)模型的方法，其特征是：步驟(1)所述的定期處死大鼠，是在制備大鼠胃潰瘍后第3、15、25天用乙醚麻醉分批處死大鼠，以胃壁涂乙酸的部位為中心，沿胃長軸進行取材，切下涂乙酸的部位，固定在4％多聚甲醛緩沖液中4小時，將固定好的組織經(jīng)酒精梯度脫水、二甲苯透明、浸蠟等過程制成蠟塊后，用Leica切片機進行4μm厚度的連續(xù)切片、粘片、烘片和染色。

3.根據(jù)權利要求1所述的一種建立大鼠乙酸胃潰瘍疾病復發(fā)模型的方法，其特征是：步驟(2)所述的檢測包括擴張腺體數(shù)量測定：將腺腔內(nèi)徑大于8μm作為判斷腺體囊狀擴張的標準，于400倍光學顯微鏡下測量H-E染色切片中再生黏膜內(nèi)呈囊狀擴張的腺體數(shù)。

4.根據(jù)權利要求1所述的一種建立大鼠乙酸胃潰瘍疾病復發(fā)模型的方法，其特征是：步驟(2)所述的檢測包括再生黏膜厚度測定：于100倍光學顯微鏡下測量H-E染色切片中再生黏膜上皮細胞表面到黏膜肌層之間的距離。

5.根據(jù)權利要求1所述的一種建立大鼠乙酸胃潰瘍疾病復發(fā)模型的方法，其特征是：步驟(2)所述的檢測包括黏膜下組織中的微血管數(shù)量測定：于低倍光學顯微鏡下找到H-E染色切片黏膜下組織的血管高密度區(qū)后，在200倍光學顯微鏡下計數(shù)已形成血管腔結構的毛細血管。

6.根據(jù)權利要求1所述的一種建立大鼠乙酸胃潰瘍疾病復發(fā)模型的方法，其特征是：步驟(2)所述的檢測包括黏膜下組織中的炎細胞數(shù)量測定：于400倍光學顯微鏡下計數(shù)H-E染色切片黏膜下組織中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、淋巴細胞、漿細胞和巨噬細胞的數(shù)量。

7.根據(jù)權利要求1所述的一種建立大鼠乙酸胃潰瘍疾病復發(fā)模型的方法在篩選治療消化性潰瘍藥物中的應用。

8.根據(jù)權利要求1所述的一種建立大鼠乙酸胃潰瘍疾病復發(fā)模型的方法在篩選抗?jié)儚桶l(fā)藥物中的應用。