[發明專利]一種建立大鼠乙酸胃潰瘍疾病復發模型的方法

無效

• 申請號: 200710068261.7
• 申請日: 2007-04-28
• 公開（公告）號: CN101069747A
• 公開（公告）日: 2007-11-14
• 發明（設計）人: 王金福;王國忠
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00;G01N33/48
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司
• 代理人: 張法高;趙杭麗

1.一種建立大鼠乙酸胃潰瘍疾病復發模型的方法，其特征是通過以下步驟實現：

(1)建立大鼠乙酸胃潰瘍及潰瘍自然愈合模型：用乙醚麻醉大鼠，剖腹后用內徑6mm的塑料管置于胃體與幽門交界處，向管內注入100％的乙酸75μl，25秒后用棉簽拭去塑料管內的乙酸，依次縫合腹壁各層，關閉腹腔，建立大鼠乙酸潰瘍模型，然后定期處死大鼠，于肉眼及顯微鏡下觀察潰瘍形態及潰瘍自然愈合過程；

(2)用阿司匹林誘導已自然愈合的潰瘍復發：在所有大鼠乙酸潰瘍制作后第25天開始，每天大鼠禁食4小時后，用灌胃的方法給予大鼠40mg/公斤體重/天的阿司匹林，然后再禁食1小時，直至在第35天、45天和55天后分批處死大鼠，檢測自然愈合后潰瘍的復發；

(3)通過測定大鼠潰瘍復發過程中的生理生化指標變化，證實胃潰瘍的復發：用過量的乙醚麻醉處死大鼠，打開腹腔，收集胃粘膜、胃粘液、血清和血漿，測定胃黏膜前列腺素E₂、胃粘液量、胃黏膜血流、表皮生長因子、轉化生長因子-α、血管內皮生長因子、腫瘤壞死因子-α和白細胞介素-1β含量，確定胃潰瘍的復發。

2.根據權利要求1所述的一種建立大鼠乙酸胃潰瘍疾病復發模型的方法，其特征是：步驟(1)所述的定期處死大鼠，是在制備大鼠胃潰瘍后第3、15、25天用乙醚麻醉分批處死大鼠，以胃壁涂乙酸的部位為中心，沿胃長軸進行取材，切下涂乙酸的部位，固定在4％多聚甲醛緩沖液中4小時，將固定好的組織經酒精梯度脫水、二甲苯透明、浸蠟等過程制成蠟塊后，用Leica切片機進行4μm厚度的連續切片、粘片、烘片和染色。

3.根據權利要求1所述的一種建立大鼠乙酸胃潰瘍疾病復發模型的方法，其特征是：步驟(2)所述的檢測包括擴張腺體數量測定：將腺腔內徑大于8μm作為判斷腺體囊狀擴張的標準，于400倍光學顯微鏡下測量H-E染色切片中再生黏膜內呈囊狀擴張的腺體數。

4.根據權利要求1所述的一種建立大鼠乙酸胃潰瘍疾病復發模型的方法，其特征是：步驟(2)所述的檢測包括再生黏膜厚度測定：于100倍光學顯微鏡下測量H-E染色切片中再生黏膜上皮細胞表面到黏膜肌層之間的距離。

5.根據權利要求1所述的一種建立大鼠乙酸胃潰瘍疾病復發模型的方法，其特征是：步驟(2)所述的檢測包括黏膜下組織中的微血管數量測定：于低倍光學顯微鏡下找到H-E染色切片黏膜下組織的血管高密度區后，在200倍光學顯微鏡下計數已形成血管腔結構的毛細血管。

6.根據權利要求1所述的一種建立大鼠乙酸胃潰瘍疾病復發模型的方法，其特征是：步驟(2)所述的檢測包括黏膜下組織中的炎細胞數量測定：于400倍光學顯微鏡下計數H-E染色切片黏膜下組織中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、淋巴細胞、漿細胞和巨噬細胞的數量。

7.根據權利要求1所述的一種建立大鼠乙酸胃潰瘍疾病復發模型的方法在篩選治療消化性潰瘍藥物中的應用。

8.根據權利要求1所述的一種建立大鼠乙酸胃潰瘍疾病復發模型的方法在篩選抗潰瘍復發藥物中的應用。