[發明專利]“蓮瓣蘭”的無菌播種和組織培養方法

無效

• 申請號: 200710065941.3
• 申請日: 2007-06-08
• 公開（公告）號: CN101066041A
• 公開（公告）日: 2007-11-07
• 發明（設計）人: 龍春林;程治英;羅吉鳳
• 申請（專利權）人: 中國科學院昆明植物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01C1/02;A01G31/00;C12N5/04
• 代理公司: 云南協立專利事務所
• 代理人: 馬曉青

1.蓮瓣蘭的無菌播種和組織培養方法，取蓮瓣蘭，經過種子萌發、增殖培養、試管苗誘導、煉苗移栽步驟，其特征在于摘取未開裂的蓮瓣蘭蒴果，用70％乙醇清洗，然后用75％的乙醇浸泡20s，再用0.2％HgCl₂消毒30min，無菌水沖洗3次，每次10min，把蒴果放在無菌濾紙上，吸干果實表面水分，剪開蒴果，將種子播在基本培養基+BA5mg·L^-1+NAA?5mg·L^-1的種子培養基上培養6-7個月，分化出根狀莖，將根狀莖接入基本培養基+BA3mg·L^-1+NAA5mg·L^-1的增殖培養基上進行增殖培養，待根狀莖逐漸轉綠，部分芽分化出，將帶有芽和根狀莖叢的團塊切割為1cm²大小，接入基本培養基+BA3mg·L^-1+IAA0.2mg·L^-1的芽誘導培養基上，根狀莖分化出叢芽，將叢芽團切割為2-3芽塊，接種在基本培養基+NAA1mg·L^-1+香蕉泥20％，pH5.5的生根培養基上3個月；前述步驟中涉及的基本培養基均為N∶P∶K＝7∶6∶19的美國Hyponex化學公司的產品花寶1號2.5g+MS有機成分、鐵鹽和微量元素+AC?0.5g·L^-1+硫2％，瓊脂固化；培養溫度26±2℃，連續光照12h·d^-1，光照強度20-40μmol·m^-2·s^-1；待芽長出一至數條根，苗長至5cm以上時，放在40μmol·m^-2·s^-1光強下煉苗15-30天，在葉片伸展、植株長高且健壯時，將小苗取出，移栽在濕潤的消毒水苔中，保濕，環境溫度保持25℃，蓋塑料膜通風保濕，待試管苗長出新葉或新根去除覆蓋膜，常規管理。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，根狀莖增殖培養5個月，這些根狀莖切割繼代，繼代3-4個月。