[發(fā)明專利]一種五環(huán)三萜皂苷類化合物及制備方法及用途

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710059520.X
• 申請日: 2007-09-06
• 公開（公告）號: CN101381396A
• 公開（公告）日: 2009-03-11
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉岱琳;陳虹;隋玉輝;白淑芳
• 申請（專利權(quán)）人: 中國人民武裝警察部隊醫(yī)學(xué)院
• 主分類號: C07J71/00
• 分類號: C07J71/00;C12P33/02;A61K31/58;A61P35/00;C12R1/66
• 代理公司: 天津市北洋有限責(zé)任專利代理事務(wù)所
• 代理人: 陸 藝

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，確切地說涉及一種五環(huán)三萜皂苷類化合物及制備方法及用途。

背景技術(shù)

朱砂根為紫金牛科紫金牛屬植物朱砂根(Ardisia?crenata?Sims)的根。性味苦、辛、涼，具有清熱解毒、散瘀止痛的作用。用于治療上呼吸道感染、扁桃體炎、白喉、丹毒、淋巴結(jié)炎、勞傷吐血、心胃氣痛、風(fēng)濕骨痛、跌打損傷等癥。百兩金皂苷A和B(ardisiacrispinA和ardisiacrispin?B)是從中藥朱砂根中分離得到的主要三萜皂苷類活性成分之一。藥理學(xué)研究表明，對人的五種腫瘤細(xì)胞具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒活性(MCF-7:IC₅₀4.72μM；NCI-H460:IC₅₀23.58μM；SF-268:IC₅₀2.36μM；HepG2:IC₅₀6.60μM)，近來研究發(fā)現(xiàn)其對HL-60(人早幼粒細(xì)胞)細(xì)胞增殖有抑制作用。同時又測定了其對正常的人胚腎293細(xì)胞的生長的影響(293:IC₅₀>24μM)，結(jié)果顯示對正常細(xì)胞的細(xì)胞毒性很小。百兩金皂苷A和B的組合物進(jìn)行HPLC檢測，百兩金皂苷A和B的總含量為99％。其性狀為白色粉末(MeOH)，可溶于甲醇、乙醇。

微生物轉(zhuǎn)化反應(yīng)就是利用微生物代謝過程中某個或一組酶對底物進(jìn)行催化的反應(yīng)。具有高度立體選擇性，不僅對結(jié)構(gòu)有化學(xué)選擇性和非對映異構(gòu)體選擇性，并且有嚴(yán)格的區(qū)域選擇性。而且反應(yīng)條件溫和，公害少，成本低廉。對中藥成分生物轉(zhuǎn)化進(jìn)行研究，其主要目的就是通過對中藥有效成分在微生物體內(nèi)的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的研究來尋找新藥源，以及對新活性成分的發(fā)現(xiàn)，新前體物質(zhì)的制備，都有著極其重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種與百兩金皂苷A相比，具有更好的水溶性，更適合藥物制劑的一種五環(huán)三萜皂苷類化合物。

本發(fā)明的第二個目的是提供一種五環(huán)三萜皂苷類化合物的制備方法。

本發(fā)明的第三個目的是提供一種五環(huán)三萜皂苷類化合物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下：

一種五環(huán)三萜皂苷類化合物，其特征是具有下述結(jié)構(gòu)：

化學(xué)名為：西克拉明皂苷元A-3β-O-{α-D-半乳吡喃糖基-(1→4)-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→2)-[β-D-木吡喃糖基-(1→2)-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→4)]}-α-L-阿拉伯吡喃糖苷。

一種五環(huán)三萜皂苷類化合物的制備方法，是由下述步驟組成：

(1)微生物的培養(yǎng)：將燕麥曲霉(AA3.4454)從固體培養(yǎng)基接種至預(yù)先配制好的液體土豆培養(yǎng)基中，所述液體土豆培養(yǎng)基100ml中含葡萄糖1-5克；置于恒溫振蕩器中，在120-180rpm，24-28℃培養(yǎng)36-72小時；

(2)將百兩金皂苷A溶于甲醇或體積百分比濃度為50％-100％的乙醇水溶液或體積百分濃度為50％的丙酮水溶液中，配成10-100mg/ml，加入步驟(1)制成的發(fā)酵液中，在120-180rpm，24-28℃，培養(yǎng)2-6日；

(3)發(fā)酵液的處理：發(fā)酵液抽濾后收集濾液，減壓濃縮至原體積的1/10-1/20，用等體積正丁醇萃取2-4遍，萃取液合并濃縮至干，獲得粗浸膏；

(4)轉(zhuǎn)化產(chǎn)物的分離純化：將步驟(3)得到的粗浸膏用大孔樹脂柱層析分離，以體積比為100：0-0：100的水-乙醇或水-甲醇梯度洗脫得到轉(zhuǎn)化產(chǎn)物富集物，利用制備高效液相制備，Rp18色譜柱，流動相為體積百分比為35％-60％的甲醇水溶液或25％-60％的乙腈水溶液，獲得化學(xué)名為：西克拉明皂苷元A-3β-O-{α-D-半乳吡喃糖基-(1→4)-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→2)-[β-D-木吡喃糖基-(1→2)-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→4)]}-α-L-阿拉伯吡喃糖苷。

所述大孔樹脂優(yōu)選：HP20型大孔樹脂、D101型大孔樹脂、AB-8型大孔樹脂、YWD-01型大孔樹脂。

一種五環(huán)三萜皂苷類化合物，化學(xué)名為：西克拉明皂苷元A-3β-O-{α-D-半乳吡喃糖基-(1→4)-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→2)-[β-D-木吡喃糖基-(1→2)-β-D-葡萄吡喃糖基-(1→4)]}-α-L-阿拉伯吡喃糖苷在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。