[發明專利]一株α－淀粉酶抑制劑生產菌及α－淀粉酶抑制劑的制備方法與應用

有效

• 申請號: 200710058410.1
• 申請日: 2007-07-27
• 公開（公告）號: CN101139569A
• 公開（公告）日: 2008-03-12
• 發明（設計）人: 白鋼;耿鵬;張蕾;高智慧;張奇
• 申請（專利權）人: 南開大學
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N15/31;C07K4/04;C07K1/34;C07K1/22;A61K38/16;A61P3/10;A61P3/04;A23L1/305
• 代理公司: 天津佳盟知識產權代理有限公司
• 代理人: 侯力

1.一株新的α-淀粉酶抑制劑生產菌株，即天藍黃鏈霉菌南開變種ZG0656(Streptomycescoelicoflavus?var.nankaiensis?ZG0656)，保藏于“中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心”，其保藏號為CGMCC?No.2097。

2.根據權利要求1所述的生產菌株，其特征為16S?rDNA序列為序列表所列的天藍黃鏈霉菌16S?rDNA序列。

3.一種用權利要求1所述的生產菌株制備α-淀粉酶抑制劑的方法，其特征是該方法包括：

第一、發酵：常規法，培養權利要求1所述的能產生α-淀粉酶抑制劑的生產菌株，使其發酵液中積累一定量的α-淀粉酶抑制劑；

第二、一級膜分離：采用截留分子量為10000～150000的膜系統，直接用一級膜分離系統，去除菌絲體，培養基中的可溶性蛋白和大分子，以及部分色素，得到澄清濾液；

第三、二級膜分離：通過一級膜分離系統得到的澄清濾液，再通過二級膜分離，采用截留分子量為5～500的膜系統，進一步濃縮，并脫鹽脫色，除去部分單糖，大量無機鹽等小分子雜質，得到澄清濃縮液；濃縮液電導值應為2000us/cm以下；

第四、樹脂吸附與洗脫：通過二級膜分離系統得到的澄清濃縮液，以樹脂吸附α-淀粉酶抑制劑，并進行洗脫；

第五、濃縮與干燥：從樹脂洗脫的α-淀粉酶抑制劑溶液，用納濾膜濃縮，經減壓干燥處理后得到α-淀粉酶抑制劑混合物精制品。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征是：一級膜分離系統采用截留分子量為10000～50000的各種超濾膜系統；二級膜分離系統采用截留分子量為150～300的各種超濾膜系統，濃縮液電導值在1000us/cm以下。

5.根據權利要求3所述的方法，其特征是：吸附樹脂為大孔吸附樹脂、或陽離子交換吸附樹脂、或二者的組合。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征是：吸附樹脂優選大孔吸附樹脂和陽離子交換吸附樹脂二者的組合。

7.根據權利要求5所述的方法，其特征是：大孔吸附樹脂選擇各類吸附非極性物質的系列樹脂，洗脫時采用體積分數為20～90％的乙醇或丙酮水溶液；

陽離子交換吸附樹脂選擇各類強酸性陽離子交換吸附樹脂，洗脫時采用0.5～2.5M的氨水溶液。

8.根據權利要求7所述的方法，其特征是：大孔吸附樹脂優選X-5型或HP-20型大孔吸附樹脂；洗脫時優選采用體積分數為40～50％的乙醇水溶液；

陽離子交換吸附樹脂優選是001×7型或001×4型強酸性陽離子交換吸附樹脂，洗脫時優選采用1M的氨水溶液。

9.根據權利要求3所述的方法，其特征是：第五步濃縮α-淀粉酶抑制劑溶液用的納濾膜是截留分子量為5～500的膜系統。

10.一種權利要求3所述方法制備的α-淀粉酶抑制劑的應用，其特征是：該α-淀粉酶抑制劑用于制備治療糖尿病、肥胖癥的藥物或功能性食品。