[發(fā)明專(zhuān)利]一株α－淀粉酶抑制劑生產(chǎn)菌及α－淀粉酶抑制劑的制備方法與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710058410.1
• 申請(qǐng)日: 2007-07-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN101139569A
• 公開(kāi)（公告）日: 2008-03-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 白鋼;耿鵬;張蕾;高智慧;張奇
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 南開(kāi)大學(xué)
• 主分類(lèi)號(hào): C12N1/21
• 分類(lèi)號(hào): C12N1/21;C12N15/31;C07K4/04;C07K1/34;C07K1/22;A61K38/16;A61P3/10;A61P3/04;A23L1/305
• 代理公司: 天津佳盟知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 侯力

【技術(shù)領(lǐng)域】本發(fā)明涉及的是一株新的α-淀粉酶抑制劑生產(chǎn)菌株，及其用于產(chǎn)生α-淀粉酶抑制劑的制備方法，以及該α-淀粉酶抑制劑在治療糖尿病等疾病方面的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】糖尿病是由胰島素分泌不足和/或胰島素作用受損引起的一組以高血糖為特征的代謝性疾病。其表現(xiàn)為血液及尿液中葡萄糖濃度異常升高，血糖、尿糖過(guò)高時(shí)可出現(xiàn)典型的“三多一少”癥狀，即多飲、多尿、多食及體重減輕，且伴有疲乏無(wú)力。糖尿病一般分為1型糖尿病、2型糖尿病和妊娠糖尿病等幾種類(lèi)型。2型糖尿病不僅可以引起微血管并發(fā)癥，如周?chē)窠?jīng)病變、眼部病變、糖尿病腎病等，而且也可以引起嚴(yán)重的大血管并發(fā)癥，如心肌梗死、中風(fēng)、下肢血管阻塞性病變等。這些并發(fā)癥危害極大，降低了人們的生活質(zhì)量，給人們帶來(lái)了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此治療糖尿病、控制糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生和發(fā)展已顯得越來(lái)越重要。

流行病學(xué)的研究表明，空腹血糖水平與餐后血糖水平這兩大血糖指標(biāo)中，餐后血糖水平尤為重要，它是葡萄糖耐受受損(IGT)的病人發(fā)展為2型糖尿病的重要因素。而且，餐后血糖水平是引起糖尿病人大血管并發(fā)癥和微血管并發(fā)癥的重要因素，這些并發(fā)癥是引起糖尿病死亡率增大的一個(gè)主要原因。所以，嚴(yán)格控制餐后血糖對(duì)糖尿病的防治具有非常重要的意義，而能夠顯著降低餐后血糖水平的抗糖尿病藥物具有很大的應(yīng)用價(jià)值。

食物中的碳水化合物絕大部分是淀粉。與膳食一起進(jìn)食后，α-淀粉酶抑制劑可與淀粉競(jìng)爭(zhēng)而與唾液和胰液中的α-淀粉酶結(jié)合，占據(jù)酶上淀粉結(jié)合位點(diǎn)，使淀粉的消化受阻。未被消化的碳水化合物被運(yùn)送至小腸中下段及結(jié)腸，從而碳水化合物的消化吸收發(fā)生在整段小腸中，延緩和延長(zhǎng)了餐后單糖(葡萄糖)的吸收，餐后血糖的增高被顯著降低。

【發(fā)明內(nèi)容】本發(fā)明的目的是提供一株新的α-淀粉酶抑制劑生產(chǎn)菌株，并利用其進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)α-淀粉酶抑制劑，以及將該α-淀粉酶抑制劑應(yīng)用于治療糖尿病，肥胖癥等疾病。

本發(fā)明提供的一株新的α-淀粉酶抑制劑生產(chǎn)菌株，即天藍(lán)黃鏈霉菌南開(kāi)變種ZG0656(Streptomyces?coelicoflavus?var.nankaiensis?ZG0656)，已于2007年6月27日保藏于“中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心”(北京市海淀區(qū)中關(guān)村北一條13號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所)，其保藏號(hào)為CGMCC?No.2097。

1)菌株來(lái)源：該α-淀粉酶抑制劑產(chǎn)生菌于2005年從采自天津市南開(kāi)大學(xué)校園的土樣中分離得到，菌株編號(hào)ZG0656。

2)形態(tài)特征：菌株ZG0656在高氏1號(hào)培養(yǎng)基上基內(nèi)菌絲發(fā)達(dá)，培養(yǎng)初期(1周)在以黃色為本底的基礎(chǔ)上，呈現(xiàn)紅色和/或藍(lán)色斑點(diǎn)，后期(2周)可產(chǎn)生明顯藍(lán)黑色，若混合原來(lái)的紅色，即呈深紫色。不產(chǎn)生可溶性色素。氣生菌絲發(fā)達(dá)，呈灰白色至粉灰色。10000倍電鏡下觀(guān)察，氣生菌絲較直，呈分枝狀，菌絲體表面光滑，有直徑明顯小于菌絲的具分枝結(jié)構(gòu)的樹(shù)枝狀突起，菌絲體纏繞聚集膨大可形成質(zhì)地致密、大小不一的球形或不規(guī)則形狀的菌核樣特化結(jié)構(gòu)，內(nèi)無(wú)孢子(這種結(jié)構(gòu)在鏈霉菌屬中比較罕見(jiàn))；形成孢子絲，呈螺旋形，菌絲斷裂形成孢子，孢子圓柱形，表面光滑(圖1)。

3)培養(yǎng)特征：在不同組分固體培養(yǎng)基上，菌株ZG0656均生長(zhǎng)旺盛。氣生菌絲發(fā)達(dá)，顏色變化不明顯，初期為白色或灰白色，后期均為粉灰色。基內(nèi)菌絲發(fā)達(dá)，顏色變化較大，在以黃色為本底的基礎(chǔ)上，初期可呈現(xiàn)各種紅色和/或藍(lán)色斑點(diǎn)，后期可產(chǎn)生明顯藍(lán)色，若混合原來(lái)的紅色，即呈深紫色。在久置的(超過(guò)8周)高氏培養(yǎng)基上，基內(nèi)菌絲偶見(jiàn)墨綠色。在各種固體培養(yǎng)基中均無(wú)可溶性色素產(chǎn)生(表1)。在以葡萄糖為碳源的液體培養(yǎng)基中可產(chǎn)生桔色水溶性色素。在以燕麥片為碳源的液體培養(yǎng)基中偶見(jiàn)西瓜紅色色素，該色素在0.01M的HCl中為粉色，在0.01M的NaOH溶液中為黃色，中性時(shí)為紅色，具有指示劑性質(zhì)；且該色素溶于乙酸乙酯和乙醇，初始呈黃色，久置呈紅色。

表1菌株ZG0656在不同培養(yǎng)基上的培養(yǎng)特征