[發明專利]弱疏水骨架酰胺樹脂合成及在銀杏總內酯純化中的應用

無效

• 申請號: 200710057753.6
• 申請日: 2007-06-26
• 公開（公告）號: CN101100495A
• 公開（公告）日: 2008-01-09
• 發明（設計）人: 王春紅;施榮富;任萍
• 申請（專利權）人: 南開大學
• 主分類號: C08F220/14
• 分類號: C08F220/14;C08F8/32;A61K36/16
• 代理公司: 天津佳盟知識產權代理有限公司
• 代理人: 侯力

【技術領域】

本發明屬于中藥有效成分的提取和分離技術領域，特別涉及一種具有弱疏水骨架的氫鍵吸附樹脂的制備方法，并建立吸附-洗脫一步法樹脂提取工藝，制備純度高于90％的銀杏總內酯。

【背景技術】

銀杏內酯是銀杏提取物中的有效成分之一，它是銀杏葉中獨有的具有特殊分子結構和顯著藥理活性的成分，是一種有效的PAF(血小板聚集誘導劑)天然拮抗劑，還可以具有提高SOD活性、消除自由基、延緩衰老的作用。近年來國內外對銀杏內酯的提取與純化開展了大量卓有成效的工作。現有的提取方法有有機溶劑萃取法和柱色譜法，溶劑萃取法的工藝過程繁瑣、操作步驟多，溶劑的損失也比較大，不太適宜于工業化生產。黃酮類化合物是銀杏提取物中的主要成分，所以除去黃酮是得到高純度內酯的重要步驟。柱提取一般采用多柱法，填料聚酰胺一般是黃酮優良吸附劑，但聚酰胺的再生困難。活性炭柱脫除有色雜質，但其回收率很低。經溶劑萃取-柱純化的提取工藝后，雖然得到內酯純度很高的產品，但經過較多的純化步驟萜內酯的損耗也較大。【韓金玉，顏迎春等，銀杏萜內酯提取與純化技術，中草藥，2002年第33卷第11期】吸附樹脂法近年來成為天然產物有效成分提取和分離的一種更經濟更簡便的方法。銀杏提取物中的兩類主要有效成分黃酮(見式1)和內酯(見式2、式3)都具有疏水骨架，目前現有樹脂都是基于疏水性聚苯乙烯，所以難于將黃酮和內酯分離。史作清等利用改性天然大分子化合物固體吸附劑可以從銀杏提取物中得到35％純度的銀杏內酯【改性天然大分子化合物吸附劑及其應用，許名成，史作清等，99100348.9，1999】。但是這種凝膠型的樹脂在水中處于高溶脹狀態，強度很差，在酒精中會收縮，在實際的柱操作過程會造成樹脂的破裂。如何利用簡便的吸附樹脂法得到高純度內酯仍然是目前研究的熱點。

R₁＝H，山奈酚衍生物

R₁＝OH，槲皮素衍生物

R₁＝OCH₃，異鼠李素衍生物

式1、銀杏黃酮的分子結構

式2、白果內酯的分子結構????式3、銀杏內酯的分子結構。

【發明內容】

本發明的目的是為了克服現有技術的上述不足，提供一種具有弱疏水骨架的氫鍵吸附樹脂的制備方法，并建立吸附-洗脫一步法樹脂提取工藝，制備純度高于90％的銀杏總內酯。

本發明為實現上述目的公開了一種弱疏水骨架的氫鍵吸附樹脂，即酰胺樹脂，該樹脂的制備方法包括：

第一、在常溫下，將分散劑聚乙烯醇溶解于水中，配成質量濃度為0.5％-2％的水相；

第二、聚合反應的總單體相由丙烯酸甲酯和二乙烯苯組成，其中丙烯酸甲酯的質量份數為總單體相的80-90％，余量為二乙烯苯，同時加入質量為總單體相質量的80-100％的庚烷作為致孔劑，占總單體相質量的1-3％的偶氮二異丁氰作引發劑，將上述各組分混合均勻后，配成反應的油相；

第三、反應開始前，先將水相倒入三口瓶中，并加熱至30-50℃后，將反應油相加入三口瓶中，水相和油相的體積比為2∶1-4∶1；開動攪拌，調節攪拌速度，至油滴尺寸在0.3-1.0mm后開始升溫，先至60-80℃反應2-6小時，再繼續升溫至85℃反應6小時，停止反應，靜置至室溫，最后經過濾、洗滌處理后得到白色樹脂；

第四、將得到的白色樹脂干燥后，在三口瓶中以N，N-二甲基甲酰胺充分溶脹后，加入占白球質量95～200％的二乙烯三胺或三乙烯四胺或多乙烯多胺在120-140℃反應8-12小時后，停止反應，靜置至室溫，經過濾、洗滌處理后得到黃色樹脂；

第五、將黃色樹脂干燥后，在三口瓶中以醋酸酐充分浸泡后，升溫至50-80℃反應7-10小時，停止反應，靜置至室溫，經過濾、洗滌后，得到本發明的樹脂，命名為酰胺樹脂。

本發明還公開了酰胺樹脂在純化銀杏總內酯中的應用，該應用包括以下步驟：

第一、將市售銀杏提取物(黃酮含量15～30％，總內酯含量5～10％)溶解在含有6～10％(v/v)乙醇的水溶液中，制得上柱液；

第二、將上述方法合成的吸附樹脂裝入吸附柱中，吸附柱直徑與柱長的比為1∶5-1∶20；

第三、室溫下，將上柱液以0.5～1.0BV/小時的流速通過樹脂吸附柱，其中黃酮化合物被吸附在樹脂柱上，而同時內酯從樹脂柱上流出；

第四、將含有內酯的流出液濃縮，濃縮體積為上柱液體積的5％-10％，靜置至室溫，待析出大量結晶，過濾、重復洗滌結晶三次后，將結晶真空干燥，即得純度為90％的總內酯。