[發(fā)明專利]區(qū)分犬瘟熱病毒疫苗株和野毒株的一段序列和一個酶切位點

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710056023.4
• 申請日: 2007-08-31
• 公開（公告）號: CN101376909A
• 公開（公告）日: 2009-03-04
• 發(fā)明（設計）人: 王鳳雪;閆喜軍;吳威;柴秀麗;張海玲;羅國良;邵西群
• 申請（專利權）人: 中國農業(yè)科學院特產研究所
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司
• 代理人: 王薇

1.區(qū)分犬瘟熱病毒疫苗株和野毒株的一段序列和RT-PCR-RFLP 方法，其特征在于：該方法包括以下步驟：

提取犬瘟熱可疑樣品RNA，利用引物組P1和P2進行兩步法RT-PCR， 擴增目的片段，取全部產物進行瓊脂糖凝膠純化試驗，回收829bp條 帶，取部分回收產物，用BamHI進行RFLP分析，瓊脂糖凝膠電泳 觀察電泳條帶大小和數目，若電泳出現2條帶，則樣品中病毒為犬瘟 熱病毒疫苗株，若電泳出現3條帶，則樣品中病毒為犬瘟熱病毒野毒 株。”

2.根據權利要求1所述的一種區(qū)分犬瘟熱病毒疫苗株和野毒株 的一段序列和RT-PCR-RFLP方法，其特征在于選擇的目的片段位于 犬瘟熱病毒NP基因的372-1200位，擴增引物為P1：5‘TTCTG AGGCA?GATGA?GTTCT?TC?3’，P2：5‘CTTGG?ATGCT?ATTTC TGACA?CT?3’。”

3.根據權利要求1所述的區(qū)分犬瘟熱病毒疫苗株和野毒株的一 段序列和RT-PCR-RFLP方法，其特征在于所述的BamHI核酸位點位 于犬瘟熱病毒NP基因829bp片段的153位(疫苗株)或153位和608 位(野毒株)。”

4.根據權利要求2所述區(qū)分犬瘟熱病毒疫苗株和野毒株的一段 序列和RT-PCR-RFLP方法，其特征在于所述的RT-PCR-RFLP分析目 的片段，切成的2個片段大小為675bp和153bp(疫苗株)，3個片段 大小為455bp、220bp和153bp(野毒株)。