[發明專利]一種基于穩定性同位素指紋圖譜鑒別道地中藥材的方法

無效

• 申請號: 200710055059.0
• 申請日: 2007-08-30
• 公開（公告）號: CN101377474A
• 公開（公告）日: 2009-03-04
• 發明（設計）人: 易現峰;楊月琴
• 申請（專利權）人: 易現峰
• 主分類號: G01N27/62
• 分類號: G01N27/62;G01N30/06;G01N1/28;G01N31/12
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技術領域

本發明涉及一種鑒別道地中藥材的方法，具體地講涉及一種利用穩定性同位素指紋圖譜鑒別道地中藥材的方法。

背景技術

中藥材是我國醫藥寶庫中的重要資源，一些名貴的中藥材由于其獨特的道地性而備受人們的青睞。然而，近幾年隨著國家政策對中藥材生產和深加工的傾斜，一些道地中藥材的生產受到沖擊，道地中藥材攙假現象嚴重，直接影響我國的中醫藥生產和出口貿易。如何準確和及時地檢測道地中藥材的質量、產地和攙假現象是我國中醫藥產業化過程中急需解決的關鍵問題之一。目前我國鑒別中藥材真假、產地主要依據人們多年的經驗，這種方法既不十分準確，又費時費力，為此開發一種能準確鑒別中藥材真假、產地的方法，成為一種現實的社會需要。

發明內容

為了克服現有技術的不足，本發明目的是提供一種利用氮和氫穩定性同位素指紋圖譜鑒別道地中藥材的方法，主要解決目前主要依據人們多年的經驗鑒別中藥材真假、產地的不十分準確問題。

為實現上述發明目的，本發明采用如下技術方案：

一種基于穩定性同位素指紋圖譜鑒別道地中藥材的方法，具體方法步驟如下：

一、首先測定道地中藥材穩定性氮同位素組成和比值，具體步驟是：

①、取樣：將道地中藥材每個樣地每個種先要從5—10個單株上分別取樣，然后合而為一，形成該種的一個樣品，所取樣品為道地中藥材的主要要用器官或組織(如充分展開的葉片、成熟枝莖或根狀莖)。

②、樣品的制備：(1)將所取樣品烘干、粉碎與稱量待測樣品放入通風干燥器內，在70℃以下烘干48h，然后將葉片不包括葉柄，葉軸用粉碎機粉碎過0.5mm的篩，裝入密閉容器(小塑料瓶或密封塑料袋)備用。(2)將樣品轉化為氣態N₂：將所測樣品裝入材料管，加入CuO(短細線狀)和銅(細顆粒狀)各1g，以及一小片銀作催化劑，密封材料管，放入爐內燃燒，一般在520℃下燃燒34h，燃燒后管內的材料被分解成N₂。

③、質譜儀測定：產生的純氣體N₂最終收集在測試管中，便可在質譜儀上進行同位素測定。通常，質譜儀在計算機輔助下直接給出同位素比值。

二、其次測定道地中藥材穩定性氫同位素組成和比值，具體步驟是：

①、取樣：將道地中藥材的植物組織，盡快冷凍并凍干，或在中等溫度下快速干燥，然后研磨至通過40目篩。在分析D/H比率之前，有機物的樣品需經過硝化處理，去除可能與環境交換的氫原子。

②、樣品的氣化、純化和分離：將測量材料裝入材料管，加入催化劑1g氧化銅、1g銅和一小片銀。將材料管與真空系統連接，抽到真空后封管，然后放入爐內燃燒。燃燒后的材料管內混雜有各種氣體，須在特制的系統中分離，使所需的氣體純化，然后收集入測試管。

③、質譜儀測定分析：產生的純氣體H₂最終收集在測試管中，便可在質譜儀上進行同位素測定。通常，質譜儀在計算機輔助下也直接給出同位素比值。

三、穩定性同位素指紋圖譜構建：

通過所測道地中藥材穩定性氮和氫同位素的比值，即可在二維坐標上構建其特征性的坐標點，進而為道地中藥材建立穩定同位素的指紋圖譜，為準確和及時地檢測道地中藥材的質量、產地和攙假現象提供一種新型的技術方法和手段。

四、道地中藥材的甄別：

由于道地中藥材的穩定性同位素組成具有特異性，通過對待測道地中藥材樣品的穩定性氮和氫同位素的測定，在已知穩定性同位素標準指紋圖譜上進行比對，若測定指標落入對應道地中藥材的坐標點范圍內，則可認定其為道地中藥材。反之，若測定的坐標點逃逸出上圖道地中藥材的坐標范圍，則認定其為非道地中藥材，或進行了攙假。依次原理，可進行其他道地中藥材的鑒別和標準制定。

本發明是利用穩定性氮和氫雙同位素技術實現快速和有效地鑒別中藥材道地性。穩定性同位素技術是基于生物體天然存在的不具有放射性同位素組成的一門分析方法。由于道地中藥材體內合成和儲存、蛋白質、氨基酸以及所有含有N元素的化合物均來自于植物對土壤中各種N元素的吸收，而植物體本身所含的水分則主要來自于道地中藥材對地表水、灌溉水和徑流水的吸收。土壤當中N元素的組成和水分特點與中藥材的道地性關系十分密切，而這又最終反應到道地中藥材本身的穩定性氮和氫同位素組成。非道地和攙假的中藥材與道地中藥材的穩定性同位素組成上具有明顯差別，通過穩定性同位素的測定即可輕松鑒別中藥材的道地性。

本發明的主要優點是：