[發(fā)明專利]一種適用于1型鴨肝炎病毒抗體乳膠凝集檢測試劑盒及應(yīng)用

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710052821.X
• 申請(qǐng)日: 2007-07-24
• 公開（公告）號(hào): CN101101297A
• 公開（公告）日: 2008-01-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡薛英;彭婉芬;程國富;谷長勤;張萬坡
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/576
• 分類號(hào): G01N33/576;G01N33/543
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務(wù)所
• 代理人: 王敏鋒

1、一種適用于1型鴨肝炎病毒抗體檢測的乳膠凝集試劑盒，它包含盒體和設(shè)在盒體內(nèi)的核心試劑，它還包括陽性對(duì)照樣品、陰性對(duì)照樣品、樣品管、刻度樣品吸管、刻度乳膠吸管和觀察結(jié)果用的載體，其特征在于，所述的核心試劑是由鴨肝炎種毒AV21111純化并滅活的I型鴨肝炎弱毒致敏聚苯乙烯乳膠得到乳膠抗原，所述的陽性對(duì)照樣品是1型鴨肝炎強(qiáng)毒抗血清，所述的陰性對(duì)照樣品是無1型鴨肝炎母源抗體的1日齡雛鴨血清，所述的載體是帶有凹窩的紙質(zhì)乳膠凝集卡。

2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述的乳膠凝集卡凹窩為圓形，窩底為黑色，凹窩周圍為白色。

3、根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的試劑盒，其特征在于，所述的乳膠凝集卡用油墨印制。

4、權(quán)利要求1所述的1型鴨肝炎病毒抗體檢測的乳膠凝集試劑盒的制備方法，其步驟在于：

1)將1型鴨肝炎病毒種毒株AV21111進(jìn)行增殖與純化，得到乳膠抗原；

2)將步驟1)的乳膠抗原致敏乳膠顆粒，得到致敏乳膠；

3)制備I型鴨肝炎病毒抗體陽性對(duì)照血清和陰性對(duì)照血清；

4)制作用于承載樣品和觀察結(jié)果的紙質(zhì)的乳膠凝集卡。

5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中純化1型鴨肝炎病毒的方法是：

1)將I型鴨肝炎弱毒株AV21111無菌接種于雞胚尿囊腔內(nèi)，蠟封，并置于37.8℃孵化箱中培養(yǎng)，剔除24h內(nèi)死亡的雞胚，無菌收取24小時(shí)后死亡的雞胚尿囊液備用；

2)在步驟1)的雞胚尿囊液中加入1％的福爾馬林溶液置于4℃滅活12h以上，先經(jīng)5000rpm離心30min，取上清，反復(fù)凍融3次，10000rpm離心30分鐘，取上清，15000rpm離心30分鐘，取上清，60000rpm離心2h，去上清，按體積比取步驟1)的尿囊液體積的1/24的磷酸鹽緩沖液(0.02M、pH7.2)洗滌沉淀，重懸得到純化的I型鴨肝炎弱毒；

3)利用掃描電鏡或核酸蛋白測定儀鑒定步驟2)的I型鴨肝炎弱毒純度。

6、根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中步驟4)所述的乳膠凝集卡帶有圓形凹窩，窩底為黑色，凹窩周圍為白色。

7、權(quán)利要求1、2或3所述的乳膠凝集卡在制備乳膠凝集檢測試劑盒中的應(yīng)用。