[發(fā)明專利]檢測痕量辣根過氧化物酶的分光光度法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710049975.3
• 申請日: 2007-09-04
• 公開（公告）號: CN101201316A
• 公開（公告）日: 2008-06-18
• 發(fā)明（設計）人: 蔣治良;馬紀
• 申請（專利權）人: 廣西師范大學
• 主分類號: G01N21/25
• 分類號: G01N21/25;G01N21/31;C12Q1/28
• 代理公司: 桂林市華杰專利事務所有限責任公司
• 代理人: 羅玉榮

1.檢測痕量辣根過氧化物酶的方法，其特征是：采用陽離子表面活性劑締合物微粒分光光度法檢測痕量辣根過氧化物酶。

2.如權利要求1所述的方法，其特征是：檢測方法包括如下步驟：

(1)在具塞試管中，分別加入HAc-NaAc緩沖溶液、KI和HRP；

(2)在步驟1的具塞試管中再加入H₂O₂，搖勻；

(3)將步驟2的試管置于溫水浴反應，再加入TPB，搖勻，用蒸餾水定容；

(4)將上述所得溶液適量倒入石英比色皿中，置于紫外可見分光光度計上掃描得到體系的吸收光譜，以不加HRP測得的吸光強度為空白；

(5)將上述所得溶液適量倒入石英比色皿中，置于紫外可見分光光度計上測定304nm的吸光度，根據(jù)所得實驗結果繪制標準工作曲線，根據(jù)該曲線，A_abs＝0.0801c+0.1252，R²＝0.9981，即可求得辣根過氧化物酶在0.4～3.2ng/mL范圍內的濃度。

3.如權利要求2所述的方法，其特征是：步驟1所述的具塞試管為5.0mL，加入的HAc-NaAc緩沖溶液，pH值為4.6～5.2，體積0.2～0.5mL，加入的KI濃度為4×10^-3mol/L～6×10^-3mol/L，加入的HRP濃度為0.1μg/mL，體積為10～80μL。

4.如權利要求2所述的方法，其特征是：步驟2所述的加入的H₂O₂濃度為1.0×10^-5～3.0×10^-5mol/L。

5.如權利要求2所述的方法，其特征是：步驟3所述的水浴溫度為20～30℃，水浴反應時間為25～50min，TPB濃度為2.0×10^-5～6.0×10^-5mol/L，用蒸餾水定容至2.5ml。

6.如權利要求2所述的方法，其特征是：步驟5所述的測定波長為304nm。