[發(fā)明專利]一種分離純化分子重組用膠原蛋白的方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710047700.6
• 申請(qǐng)日: 2007-11-01
• 公開（公告）號(hào): CN101157719A
• 公開（公告）日: 2008-04-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳文惠;朱夕波;張艷;包斌;王南平;李燕;繆輝南
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海水產(chǎn)大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K1/36
• 分類號(hào): C07K1/36;C07K1/12;C07K1/16;C07K14/47
• 代理公司: 上海正旦專利代理有限公司
• 代理人: 陸飛;盛志范

1.一種分離純化分子重組用膠原蛋白的方法，其特征在于具體步驟如下：將鯊魚頭皮用濃度為10-20mmol/L、pH值為7.4-7.6的磷酸緩沖液浸泡、沖洗，去掉鱗和殘肉，切成(0.3-0.6cm)×(0.3-0.6cm)小塊；再用去離子水浸泡沖洗，清洗干凈的鯊魚頭皮用濃度為50-100mmol/L、pH值為7.4-7.6的磷酸緩沖液浸泡處理50-80小時(shí)，勻漿；低溫2℃-8℃中速3000-5000r/min離心，取上清液；上清液用高飽和度硫酸銨鹽析，低溫2℃-8℃中速3000-5000r/min離心，保留沉淀物；將沉淀物溶在濃度為150-250mmol/L、pH值為6.8-7.2的磷酸緩沖液中，用葡聚糖凝膠層析，收集蛋白洗脫液，濃縮，再真空冷凍干燥，即得所需膠原蛋白。

2.一種如權(quán)利要求1所述方法制備的分子重組膠原蛋白。

3.一種分子重組膠原蛋白的制備方法，其特征在于具體步驟如下：將由權(quán)利要求1所述方法制備的膠原蛋白0.8-1.0g，溶于45-55ml濃度為2.5-3.5mg/ml?1-乙基-3-(3-二甲丙氨基)碳化二酰亞胺和5.4-5.8mg/ml羥基琥珀酰亞胺的pH值為5-6溶液中，室溫保持2-2.5小時(shí)，完成交聯(lián)化；室溫下離心3000-4000rpm/min，5-6min；除去上清液，添加50-55ml濃度為0.1-0.15M的Na₂HPO₄，室溫保持2-2.5小時(shí)，用上述條件離心，除去上清液，用無(wú)離子水清洗，真空冷凍干燥，獲得分子重組膠原蛋白。