[發(fā)明專利]貝類外套膜膠原蛋白及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710046307.5
• 申請(qǐng)日: 2007-09-24
• 公開（公告）號(hào): CN101157723A
• 公開（公告）日: 2008-04-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉承初;周海燕;王金余;李應(yīng)森;李家樂
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海水產(chǎn)大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K14/435
• 分類號(hào): C07K14/435;C07K1/14
• 代理公司: 上海天翔知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 劉粉寶

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物資源與環(huán)境技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種貝類外套膜膠原蛋白產(chǎn)品及其制備方法。

背景技術(shù)

膠原蛋白是動(dòng)物體尤其是哺乳動(dòng)物體內(nèi)含量最多的蛋白質(zhì)，廣泛存在于動(dòng)物的皮、骨、軟骨、牙齒、肌腱、韌帶和血管中，占人體蛋白質(zhì)總量的30％，是結(jié)締組織極重要的蛋白結(jié)構(gòu)，起著支撐器官、保護(hù)肌體的功能。目前，膠原蛋白已被廣泛應(yīng)用于美容化妝品、人工皮膚、組織工程等生物醫(yī)用材料和食品保健等方面。工業(yè)生產(chǎn)中的膠原蛋白主要來源于牛皮、豬皮和骨骼中。由于瘋牛病和口蹄疫等傳染病的發(fā)生，利用牛皮、豬皮提取膠原蛋白已使人們對(duì)牲畜膠原制品安全性產(chǎn)生疑慮，為了解決這一問題，尋找新的提取膠原蛋白的原料愈來愈迫切。水產(chǎn)動(dòng)物廢棄物中含有豐富的膠原蛋白，具有很大開發(fā)利用潛力。

目前國(guó)內(nèi)對(duì)膠原蛋白的研究主要集中在魚鱗、魚皮、海蜇、海洋空腸生物等，已公開的專利主要有“未變性魚鱗膠原的制備方法”(公開號(hào)[CN1948411A])、“從魚鱗中提取膠原蛋白的脫脂脫灰工藝”(公開號(hào)[CN1800216A])、“魚鱗膠原蛋白的生產(chǎn)方法”(公開號(hào)[CN1628540A])、“一種從魚鱗中提取膠原蛋白的方法”(公開號(hào)[CN1888075A])、“魚鱗膠原蛋白及其制造方法”(公開號(hào)[CN1986828A])、“一種魚鱗膠原蛋白生產(chǎn)工藝”(公開號(hào)[CN1775950A])、“II型膠原蛋白復(fù)合物制備工藝”(公開號(hào)[CN1721546A])、“海蜇膠原蛋白及其制備方法”(公開號(hào)[CN1803836A])等，但還未見貝類動(dòng)物膠原蛋白產(chǎn)品及其制備方法的專利及研究報(bào)道。

據(jù)調(diào)查，目前全國(guó)育珠面積已超過85萬(wàn)畝，年接種珠蚌約5億～8億只。隨著我國(guó)淡水珍珠產(chǎn)量的逐年增加，采珠后蚌廢棄物的產(chǎn)量也在增加，每年采珠后我國(guó)約有3萬(wàn)噸的蚌廢棄物產(chǎn)生，其中軟體部分的廢棄物約達(dá)到1.2萬(wàn)噸，廢棄物中只有不到0.1％的部分得到了開發(fā)利用，除加工成低附加值的飼料外，往往都被丟棄，沒有得到充分利用，這樣做不但對(duì)環(huán)境遭成了重大污染，同時(shí)也是對(duì)資源的一種浪費(fèi)，更加劇了現(xiàn)今珍珠產(chǎn)業(yè)的負(fù)擔(dān)。經(jīng)我們研究，蚌外套膜中蛋白質(zhì)含量約占總干物質(zhì)的50％，其中近一半為膠原蛋白，因此回收蚌外套膜中的膠原蛋白，不但可以把采珠后的廢棄物充分利用，而且還可以作為一種新的膠原蛋白原料，同時(shí)還保護(hù)了環(huán)境，提高珍珠產(chǎn)業(yè)的附加值。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種貝類外套膜膠原蛋白產(chǎn)品及其制備方法。

為達(dá)到上述目的，一方面本發(fā)明公開了一種貝類動(dòng)物膠原蛋白，所述膠原蛋白從貝類的外套膜中提取，呈白色、絮狀、無腥味，其α肽鏈的分子量為430KD，變性溫度31℃，特征粘度11.2dL/g，每1000個(gè)氨基酸殘基中含甘氨酸、脯氨酸和羥脯氨酸分別為265、88、56。

另一方面，上述對(duì)膠原蛋白進(jìn)行提取回收的方法具體實(shí)施如下：

a)清洗貝類外套膜；

b)均質(zhì)：加入1～20倍體積的含0.1～5％磷酸鹽的洗出液，搗碎均質(zhì)后，再攪拌處理0.5h～10h；

c)去除雜蛋白：離心，5000～10000g，10～30min，去除上清液；

d)重復(fù)進(jìn)行步驟b和c操作1～3次；

e)抽提膠原蛋白：步驟d)所得沉淀加入1～20倍體積0.5M弱酸，5～15℃下提取2～72h；

f)鹽析：離心取上清液，加入1～5M中性鹽使膠原蛋白在該體系中沉淀出來；

g)透析、干燥。

其工藝流程如下：

所述貝類可為馬氏珍珠貝、白碟貝黑碟貝、企鵝貝、三角帆蚌、褶紋冠蚌池碟蚌或背角無齒蚌中之一或組合。

所述貝類的外套膜，可為新鮮原料或經(jīng)過低溫保藏處理的冷凍原料及其搗碎原料。

所述所用水可以為蒸餾水、純凈水，最好為去離子水。

上述0.1～5％(w/v)磷酸鹽溶液洗出液優(yōu)選磷酸氫二鈉。

所述的抽出液為0.1-0.5M弱酸可以為醋酸、檸檬酸和乳酸等，以醋酸為最佳，可添加或不添加各種來源的酸性蛋白酶。

所述的中性鹽可采用KCl、NaCl等。

所述干燥方法最好用真空干燥以及冷凍干燥，以避免蛋白質(zhì)變性，影響其功能特性。