[發明專利]天麻多糖或其硫酸化衍生物及其制備方法和應用

無效

• 申請號: 200710044992.8
• 申請日: 2007-08-17
• 公開（公告）號: CN101367879A
• 公開（公告）日: 2009-02-18
• 發明（設計）人: 丁侃;左建平;邱宏;唐煒
• 申請（專利權）人: 中國科學院上海藥物研究所
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K31/715;A61P31/12
• 代理公司: 北京金信立方知識產權代理有限公司
• 代理人: 朱梅;黃麗娟

1.一種從天麻中提取的天麻多糖，其結構式如下：

其中x和y為整數且x+y＝16，

n為整數，其峰尖分子量為2.8×10⁵，在其0.5mg/ml水溶液中的比旋度為+95°。

2.一種如權利要求1所述的天麻多糖的硫酸化衍生物，該衍生物是天麻多糖主要在6位羥基上的硫酸化衍生物，其峰尖分子量為1.9×10⁵，在其0.5mg/ml水溶液中的比旋度為+142.8°。

3.一種從天麻中提取權利要求1所述的天麻多糖的方法，該方法步驟如下：

1)水提粗多糖的制備：干燥的天麻飲片，經乙醇脫脂、干燥后，用熱水反復提取2～5次，合并提取液；所得提取液濃縮后用三氯乙酸脫蛋白，離心分離，所得上清液經中和、透析、濃縮，得到一濃縮液；加入2-5倍于濃縮液體積的乙醇，離心分離得沉淀，該沉淀經真空干燥，得水提粗多糖；

2)天麻多糖的制備：向上述步驟1)得到的水提粗多糖加入適量水溶解并離心，上清液用二乙基氨乙基纖維素為載體進行柱層析分離，分別以水、0.1～0.4mol/l?NaCl溶液剃度洗脫，其中0.1mol/l?NaCl洗脫液經濃縮、透析以及冷凍干燥得到白色絮狀固體天麻多糖。

4.根據權利要求3所述的方法，其特征是，在所述步驟1)中，取天麻干燥飲片，用95wt％乙醇脫脂1周，脫脂后室溫自然干燥；干燥后，用100℃水反復浸漬天麻飲片數次，至提取液用硫酸-苯酚檢測無明顯反應，將每次的提取液合并后加熱濃縮；所得濃縮液冷卻后以15％(W/V)三氯乙酸溶液脫蛋白，離心分離，所得上清液用1mol/lNaOH中和至pH7.0，然后對流動水透析72h，內液濃縮至小體積，在攪拌下加入三倍體積的95wt％乙醇，靜置過夜，傾去上清液，離心分離，所得沉淀依次用2倍體積的無水乙醇、丙酮洗滌以脫去水分，離心分離，所得沉淀置40℃下真空干燥，得水提粗多糖；

在所述步驟2)中，取水提粗多糖，用適量水溶解，離心除去不溶物，上清液通過二乙基氨乙基纖維素柱進行分離；逐步以水、0.1mol/lNaCl、0.2mol/l?NaCl和0.4mol/l?NaCl洗脫，用硫酸-苯酚法繪制洗脫曲線，根據洗脫曲線分別收取合并洗脫液，其中0.1mol/l?NaCl的洗脫液經濃縮，對蒸餾水透析，所得透析袋內液冷凍干燥得天麻多糖。

5.一種由權利要求1所述的天麻多糖制備權利要求2所述的天麻多糖硫酸化衍生物的方法，該方法步驟如下：經分子篩處理的吡啶冰浴冷卻后，將氯磺酸逐滴加入到吡啶中制成酯化試劑；經分子篩處理的甲酰胺中溶解天麻多糖，該溶液冰浴冷卻下，然后往該溶液中逐滴加入上述制備的酯化試劑；反應完畢，反應液調pH值至7.8，然后濃縮，所得濃縮液對飽和的NaHCO₃溶液透析后，換成對水透析；透析袋內液冷凍干燥得天麻多糖的硫酸化衍生物。

6.根據權利要求5所述的方法，其特征是，該方法步驟如下：經分子篩處理的吡啶冰浴冷卻后，以氯磺酸/吡啶V/V＝2:1的氯磺酸逐滴加入到吡啶中制成酯化試劑；每8ml?分子篩處理的甲酰胺中溶解158.9mg的天麻多糖，該溶液冰浴至0℃，然后往溶液中逐滴加入2ml新鮮制備的酯化試劑；加畢，45℃水浴反應4h；反應完畢，反應液用5mol/l?NaOH調pH值至7.8，然后<30℃減壓濃縮至小體積；濃縮液對2L飽和的NaHCO₃溶液透析24h后，換成對2L去離子水透析，每次24h，共三次；透析袋內液冷凍干燥得天麻多糖的硫酸化衍生物。

7.如權利要求2所述的天麻多糖硫酸化衍生物作為登革熱病毒抑制劑在制備治療抗登革熱病毒感染的疾病的藥物中的應用。