[發明專利]一種分離純化β－葡萄糖苷酶的方法無效
| 申請號： | 200710043571.3 | 申請日： | 2007-07-06 |
| 公開（公告）號： | CN101121929A | 公開（公告）日： | 2008-02-13 |
| 發明（設計）人： | 周珮;嚴欽;馮美卿;李幸慰;周偉 | 申請（專利權）人： | 復旦大學 |
| 主分類號： | C12N9/42 | 分類號： | C12N9/42 |
| 代理公司： | 上海正旦專利代理有限公司 | 代理人： | 吳桂琴 |
| 地址： | 20043*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 分離 純化 葡萄 糖苷酶 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種分離純化β-葡萄糖苷酶的方法，其特征是以微晶纖維素作為β-葡萄糖苷酶的親和柱層析介質，在低溫和微酸性條件下，將β-葡萄糖苷酶上樣并特異性吸附于微晶纖維素柱，然后通過增加NaCl濃度的方法將該酶洗脫，分離純化β-葡萄糖苷酶。
2.按權利要求1所述的分離純化β-葡萄糖苷酶的方法，其特征是所述的方法包括下述步驟：
1)將微晶纖維素經表面活性洗滌劑處理，再用蒸餾水沖洗干凈，除去雜質后裝柱，用不含NaCl的微酸性緩沖液平衡；
2)分離純化β-葡萄糖苷酶：用于分離純化的粗酶液在平衡緩沖液中透析后，上樣于步驟1的平衡的微晶纖維素柱，用平衡緩沖液洗脫后，增加緩沖液中的NaCl濃度，至目標β-葡萄糖苷酶被洗脫；
3)產品純度鑒定：收集具β-葡萄糖苷酶活性的部分，SDS-PAGE蛋白膠鑒定蛋白純度。
3.按權利要求1所述的分離純化β-葡萄糖苷酶的方法，其特征是所述的低溫是0-10℃。
4.按權利要求3所述的分離純化β-葡萄糖苷酶的方法，其特征是所述的低溫是4-6℃。
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