[發明專利]一種高產核苷磷酸化酶的菌種及阿糖核苷的合成方法無效
| 申請號: | 200710043257.5 | 申請日: | 2007-06-29 |
| 公開(公告)號: | CN101113420A | 公開(公告)日: | 2008-01-30 |
| 發明(設計)人: | 魏曉琨;丁慶豹;歐伶;閻蓬勃;邱蔚然 | 申請(專利權)人: | 上海蔚平生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12N1/20 | 分類號: | C12N1/20;C12P19/40 |
| 代理公司: | 上海東亞專利商標代理有限公司 | 代理人: | 孔德力 |
| 地址: | 200235*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 高產 核苷 磷酸化酶 菌種 合成 方法 | ||
1.一種產氣腸桿菌(Enterobacter?aerogenes)DWOQ-58,保藏號為:CGMCCNo.2035。
2.根據權利要求1的產氣腸桿菌DWOQ-58的培養方法,以碳源、氮源、無機鹽以及必要的維生素等有機營養素加以培養,所說的碳源選自葡萄糖、淀粉水解糖、糖蜜、蔗糖、乳糖、果糖、檸檬酸鹽、丙二酸鹽中的一種或多種;所說的氮源選自氨水、酵母膏、牛肉膏、玉米漿、蛋白胨、大豆水解液、氨基酸復合液中的一種或多種,所說的無機鹽選自磷酸鹽、錳鹽、鉀鹽、鐵鹽中的一種或多種,所說的維生素選自VB、VB6。
3.用權利要求1所述的菌種生產阿糖嘌呤類核苷的方法,包括如下步驟:
(1)培養并收集本發明的產氣腸桿菌DWOQ-58,和,
(2)用將所說的產氣腸桿菌DWOQ-58與阿糖供體、嘌呤堿基受體接觸,其特征在于,緩沖液pH5.0-10.0,反應溫度為30-70℃,反應時間4-12小時,阿糖供體和嘌呤堿基受體的濃度為5-50mmol/L,菌體加入量為1-20%(菌體濕重g/100mL)。
4.根據權利要求3所述的生產阿糖嘌呤類核苷的方法,其特征在于pH為6.5-8。
5.根據權利要求3所述的生產阿糖嘌呤類核苷的方法,其特征在于反應溫度40-60℃。
6.根據權利要求3所述的生產阿糖嘌呤類核苷的方法,其特征在于阿糖供體和嘌呤堿基受體的濃度為10-30mmol/L。
7.根據權利要求3所述的生產阿糖嘌呤類核苷的方法,其特征在于菌體加入量為5-15%(菌體濕重g/100mL)。
8.根據權利要求3所述的生產阿糖嘌呤類核苷的方法,其特征在于pH為6.5-8,反應溫度40-60℃,阿糖供體和嘌呤堿基受體的濃度為10-30mmol/L,菌體加入量為5-15%。
9.根據權利要求3~8任一所述的生產阿糖嘌呤類核苷的方法,其特征在于,阿糖供體選自阿糖尿苷、阿糖5-甲基尿苷、阿糖胞苷或其相應的磷酸鹽,嘌呤受體選自腺嘌呤,二氨基腺嘌呤,次黃嘌呤。
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