[發明專利]組織工程化移植物的處理方法

有效

• 申請號: 200710043014.1
• 申請日: 2007-06-29
• 公開（公告）號: CN101332312A
• 公開（公告）日: 2008-12-31
• 發明（設計）人: 崔磊;曹誼林;劉廣鵬;王衡健
• 申請（專利權）人: 上海國睿生命科技有限公司
• 主分類號: A61L27/36
• 分類號: A61L27/36
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司
• 代理人: 徐迅

技術領域

本發明涉及醫學工程領域，尤其涉及組織工程化移植物的保存方法。

背景技術

組織工程移植物的產業化需要有大批量產品的生產和臨床使用，更重要的 是，在組織缺損病人急需組織移植時，希望立即提供可移植的工程化產品。為 了縮短工程化移植物構建過程所需的時間，盡快提供可供移植的缺損組織或部 位的替代材料，必需解決組織工程化移植物的保存問題。

根據保存溫度不同，保存方式可以分為常溫保存和低溫保存。對于有活性 的組織工程產品，在其保存期間應盡量降低甚至關閉所有的生化反應，而溫度 是控制生化反應的重要因素，降低儲存溫度可以極大地抑制組織內的生化反 應。目前使用最多的低溫保存溫度是4℃和深低溫(-196℃)。4℃條件下，細 胞內外僅存有少量生化反應，研究表明，4℃條件下，細胞的活性呈逐漸下降 的趨勢，而且伴隨著細胞水腫、核固縮、空泡形成等形態學的改變。可見，4 ℃保存對細胞的活性還是有損傷，故臨床主要應用于短時間內(24小時內)保 存組織和器官。在-196℃條件下，細胞內外的反應都會終止，但是由于低溫凍 存操作相對復雜，對儀器以及凍存方案要求較高，而且在降溫過程中細胞內形 成的冰晶會在降溫和復溫過程中對細胞造成冰晶損傷和溶質損傷，使其在組織 和器官保存中的應用受到很大限制，其在組織工程領域的使用也只限于種子細 胞凍存的研究階段，目前尚未組織工程復合物低溫凍存的研究和報道。

在37℃下，細胞內大多數酶的活性都處于最高水平，各種酶促反應、氧化 反應也最為活躍，細胞活性、功能都維持在相對較高水平。但由于新陳代謝旺 盛，也會由此帶來在體外細胞、組織的活性不能較長時間地保持的問題。因此 目前尚無理想的保存液與之配合，也沒有在此溫度下細胞、組織保存的研究報 道。

目前常用的組織、器官保存液有Euro-Collins液、SackII液、UV液等。 主要用于4℃下短時間內(24小時內)保存組織和器官，目前尚無保存液在常 溫下或者37℃較長時間保存器官和組織。

對于急需使用的移植物，如果仍然采用低溫或深低溫保存，不但耗時耗力、 成本極高，而且會因為要經過復蘇等過程給細胞帶來損傷。

因此，本領域迫切需要一種可短期保存移植物的方法，它不會給移植物帶 來損傷，而且可以保持其良好的生理性能，同時成本低廉且便于操作。

發明內容

本發明旨在提供一種組織工程化移植物的處理方法。

本發明的另一個目的是提供成骨誘導液或成軟骨誘導液的一種用途。

在本發明的第一方面，提供了一種組織工程化移植物的處理方法，它包括步驟：

(a)在37±2℃將骨移植物或軟骨移植物和成骨誘導液或成軟骨誘導液放置 在一容器中2小時—14天；和

(b)從容器中取出骨移植物或軟骨移植物作為移植手術準備材料。

在另一優選例中，所述骨移植物中單位體積中成骨樣組織占30—80％；所述 軟骨移植物中單位體積中成軟骨樣組織占40—70％。

在另一優選例中，步驟(a)中是將骨移植物或軟骨移植物和新鮮配制的成骨 誘導液或成軟骨誘導液放置在一容器中2小時—14天，且不更換誘導液。

在另一優選例中，步驟(a)中所述容器是密封容器。

在另一優選例中，步驟(a)中是將骨移植物或軟骨移植物和新鮮配制的成骨 誘導液或成軟骨誘導液放置在一容器中3—10天。

在另一優選例中，步驟(a)中是將骨移植物或軟骨移植物和新鮮配制的成骨 誘導液或成軟骨誘導液放置在一容器中4—7天。

在另一優選例中，在所述步驟(a)前還包括步驟：

(a’)移植物在誘導液中培養5—9天，每周換液2次。

在另一優選例中，所述的骨移植物是骨髓基質干細胞和人脫鈣骨復合物。

在另一優選例中，所述的成骨誘導液中含有10±5nmol/L地塞米松，10± 5nmol/Lβ—甘油磷酸鈉和50±20μmol/L2—磷酸抗壞血酸。

在另一優選例中，所述的成骨誘導液中含有10±3nmol/L地塞米松，10± 3nmol/Lβ—甘油磷酸鈉和50±10μmol/L2—磷酸抗壞血酸。

在另一優選例中，步驟(a)中的容器由運輸工具由一地運送到另一地，所述 的運輸工具包括汽車、輪船、火車和/或飛機；一地至另一地的距離在500米—10000 公里。