[發(fā)明專利]季胺鹽改性的殼聚糖載藥納米粒子的制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710041716.6
• 申請日: 2007-06-07
• 公開（公告）號: CN101085358A
• 公開（公告）日: 2007-12-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 萬錒俊;孫燕;鄭一寧;陳宇鵬
• 申請（專利權(quán)）人: 上海交通大學(xué)
• 主分類號: A61K47/36
• 分類號: A61K47/36;A61K47/48;C08B37/08
• 代理公司: 上海交達(dá)專利事務(wù)所
• 代理人: 王錫麟;王桂忠

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種醫(yī)藥工程技術(shù)領(lǐng)域的制備方法，具體是一種季胺鹽改性的殼聚糖載藥納米粒子的制備方法。

背景技術(shù)

殼聚糖是一種帶正電荷的天然多糖，無毒、無刺激性、無致敏性、無致突變作用，具有良好的生物相容性和生物降解性。由于殼聚糖分子量大，所以只停留在膜的表面，不會滲透到膜的內(nèi)部，所以無毒副作用。殼聚糖的正電性特點(diǎn)使其在液態(tài)介質(zhì)中可與帶負(fù)電荷的聚合物、大分子甚至一些聚陰離子相互作用，由此發(fā)生的溶膠凝膠轉(zhuǎn)變過程則可方便地用于載藥納米微粒的制備。殼聚糖作為藥物載體可以控制藥物釋放、延長藥物療效、降低藥物毒副作用，提高疏水性藥物對細(xì)胞膜的通透性和藥物的穩(wěn)定性及改變給藥途徑，還可以大大加強(qiáng)制劑的靶向給藥能力。近年來殼聚糖在靶向給藥輸送方面受到人們的關(guān)注。

然而，在中性或生理環(huán)境下(pH＝7.4)，殼聚糖將從溶液中沉淀出來，失去其正點(diǎn)特性。研究表明只有帶正電的，水溶性的殼聚糖才可打開上皮細(xì)胞的緊密聯(lián)結(jié)。季胺鹽改性的殼聚糖由于其具備永久正電性和生理環(huán)境下的水溶性引起了廣泛的研究興趣。殼聚糖的一些水溶性衍生物如N-(2-羥基)丙基-3-三甲基氯化銨殼聚糖(HTCC)，羧甲基殼聚糖以及它們的納米粒子已經(jīng)被制備和研究。其中季胺鹽殼聚糖因?yàn)槠淇咕院湍承┌邢蛐栽谥扑帉W(xué)上有更加廣泛的應(yīng)用。但是，由于殼聚糖C₂-NH₂跟環(huán)氧丙基三甲基氯化銨(GTMAC)的反應(yīng)，殼聚糖制備的HTCC失去了殼聚糖本來的C₂位上正電氨基。為了克服這個(gè)問題，我們合成了一種新型的殼聚糖季胺鹽O-(2-羥基)丙基-3-三甲基氯化銨殼聚糖(O-HTCC)，其合成條件是，保護(hù)殼聚糖的二位氨基的前提下，C₆-OH跟GTMAC反應(yīng)。

保護(hù)殼聚糖二位氨基然后對殼聚糖六位上的羥基進(jìn)行季銨鹽改性，不僅克服了其在生理環(huán)境下的非溶解性，而且因?yàn)橐肓烁嗟恼姾桑槐Ｗo(hù)了的氨基也會在適當(dāng)?shù)沫h(huán)境下帶正電荷，所以將殼聚糖的季銨鹽制成載藥納米粒子后對藥物的包埋和負(fù)載以及在體內(nèi)的特意性靶向有更深的意義。

經(jīng)對現(xiàn)有技術(shù)的文獻(xiàn)檢索發(fā)現(xiàn)，Yongmei?Xu等在Biomaterials(《生物材料》)2003年24期5015-5022頁上發(fā)表的“Preparation?and?modification?of?N-(2-hydroxyl)propyl-3-trimethyl?ammonium?chitosan?chloride?nanoparticle?as?a?protein?carrier”(作為一種蛋白質(zhì)載體的N-(2-羥基)丙基-3-三甲基氯化銨殼聚糖納米粒子的制備和修飾)，該文中利用殼聚糖的二位氨基和環(huán)氧丙基三甲基氯化銨(GTMAC)反應(yīng)，生成一種季胺鹽改性的殼聚糖即HTCC，其結(jié)果是在很大程度上提高了蛋白藥物的包封率，但是有較高的藥物突釋，用海藻酸鈉鹽和聚乙二醇改性后的HTCC納米粒子減少了蛋白藥物的突釋。其不足之處是由于二位氨基上的季胺化改性，此種季胺鹽(HTCC)納米粒子在溶液中喪失了二位氨基上的正電性。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種季胺鹽改性的殼聚糖載藥納米粒子的制備方法。殼聚糖季胺鹽O-(2-羥基)丙基-3-三甲基氯化銨殼聚糖(O-HTCC)及其納米粒子，用其負(fù)載蛋白類大分子藥物以及小分子藥物，使其在獲得對多種藥物的緩釋效果的同時(shí)，實(shí)現(xiàn)靶向釋放，不僅制備了殼聚糖季銨鹽載藥納米粒子，而且提高了殼聚糖納米粒子載藥以及單個(gè)和兩個(gè)季銨鹽殼聚糖載藥納米粒子釋放和載藥性能。

本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的，本發(fā)明具體包括如下步驟：

步驟一，首先是在保護(hù)2位氨基的條件下，在殼聚糖的6位羥基上引入季胺基團(tuán)，完成對殼聚糖上的C₆-OH基團(tuán)進(jìn)行季胺化改性，得到單季胺鹽改性殼聚糖(O-HTCC)或雙季胺鹽改性殼聚糖(Dia-O-HTCC)；

步驟二，接著是在三聚磷酸鈉(TPP)存在下，且控制使季胺鹽改性殼聚糖/TPP＝6/1～3/1，室溫包藥2小時(shí)，完成制備載藥納米粒子。

步驟一中，所述的對殼聚糖上的C₆-OH基團(tuán)進(jìn)行季胺化改性，具體通過以下兩種方法中任一種進(jìn)行：

其方法(1)：