[發明專利]一種反義硫代核苷酸的抗腫瘤應用

無效

• 申請號: 200710041550.8
• 申請日: 2007-06-01
• 公開（公告）號: CN101066465A
• 公開（公告）日: 2007-11-07
• 發明（設計）人: 崔雅迪;翟培彬;陳仁海;陳希中;林英略;王巍;黃旭華
• 申請（專利權）人: 上海凱姆生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61K31/7052;A61P35/00;A61P11/00
• 代理公司: 上海泰能知識產權代理事務所
• 代理人: 黃志達;謝文凱

技術領域

本發明屬生物技術領域，特別是涉及一種反義硫代核苷酸的抗腫瘤應用。

背景技術

癌癥是威脅人類生命的第一大疾病，全球每年約有700萬人死于癌癥。隨著世界人口老齡化的加劇，人類生存環境的惡化，癌癥發病率逐年上升，給患者帶來巨大痛苦，也給整個社會造成了沉重負擔。

通常認為，腫瘤的發生是一個多因素促進的過程，其中包含遺傳因素、感染因素、理化因素和基因突變等等。用于癌癥治療的手段依然是外科手術，放療和化療。目前臨床常用抗腫瘤藥物約80余種，依據藥物作用的分子靶點大致可以分為：①作用于DNA結構的藥物如烷化劑、蒽環類和鉑類化合物等；②影響核酸合成的藥物，主要是指抗代謝物；③影響DNA轉錄，RNA合成的藥物，如放線菌素、阿霉素等；④影響蛋白質合成的藥物，如鬼臼素、長春花堿、門冬酰胺酶等。

這些藥物多屬于細胞毒類藥物，專一性差，在殺死腫瘤細胞的同時也會對正常細胞造成較大影響，臨床上表現為較為嚴重的副作用，這也是當前使用化療藥物治療癌癥的過程中最令人頭痛的問題。此外，長期使用此類藥物可能誘發癌細胞的耐藥性，使得化療藥物對腫瘤的生長與惡化無能為力。因此，如果存在一種藥物，既可以高特異性的殺傷腫瘤細胞而不影響正常細胞，又可以有效的提高腫瘤細胞對化療藥物的敏感性，那么，這一藥物無疑將具有更大的優勢。而開發用于腫瘤治療的反義核苷酸類藥物很可能就擁有這些優越性。

反義藥物又稱反義寡聚核苷酸藥物(antisense?oligonucleotide，ASO)，是人工合成的脫氧核糖核苷酸類似物，通常具有15-20個堿基序列的長度，可以通過Watson-Crick堿基配對的形式靶向性的與細胞內的特定mRNA結合，抑制該mRNA編碼的蛋白質的翻譯過程。實現這類抑制具有幾種可能的機制，如①反義藥物的結合誘導mRNA被RNase?H降解；②空間位阻的形式影響mRNA的翻譯③影響RNA的正常剪接。

反義藥物同傳統的小分子藥物相比具有較大差異，具體表現在分子結構、作用靶點和作用機理等方面。

首先，反義藥物是遺傳物質DNA的類似物，是一個有序的鏈狀分子，只是在骨架或核糖部位作了簡單的化學修飾。傳統化藥的空間構型和關鍵的官能團決定其活性，而反義藥物活性則由一連串的堿基序列來決定，擁有更多的活性位點。

其次，反義藥物的作用靶點是mRNA，而非蛋白質。在反義藥物之前，從來沒有人將mRNA提到作為藥物作用的靶點這一層次上來。傳統意義上的小分子藥物通常是通過影響配體受體結合或者蛋白之間的相互作用來實現對蛋白質功能的調節。反義藥物則作用于這些生理活動的更上游—蛋白質的合成過程，在根本上影響到靶蛋白在細胞內的表達水平。

人類基因組測序工作的完成，為我們揭示了人體內多達35000個基因及其多樣的RNA剪接方式。這些海量的信息為我們提供了尋找治療疾病的靶點的巨大便利。

但是，使用小分子化合物對靶蛋白的正常生理功能進行調節的機會并不是太多。而且，尋找具有足夠活性和特異性的小分子也十分困難。反義藥物則在此體現出其優勢。因為：①理論上，所有基因的表達都可以被特定的反義藥物調節；②同樣在理論計算中，人類基因組任何一個長度超過17個堿基的序列都只出現一次，保證了反義藥物的特異性；③watson-crick堿基配對形式的結合保證了反義藥物具有足夠強的結合活性；④反義藥物的序列信息就包含在基因組中，尋找活性反義藥物序列要比尋找活性小分子化合物容易的多。因此，在當今的科技時代背景下，直接作用于mRNA的反義藥物技術無疑將成為靶向治療的理想技術。

目前，已有多種反義藥物被應用于疾病的臨床治療。其中，美國ISIS公司開發的用于治療HIV病人并發癥—CMV型視網膜炎的硫代寡核苷酸類反義藥物Vitravene(ISIS2922)已經被批準在美國、歐洲和拉丁美洲上市，成為第一個成功上市的反義藥物。其它類型的反義藥物大多處于研究開發階段，例如：人工合成互補于c-myc的mRNA寡核苷酸，可以在體外抑制人白血病細胞的增殖(Holt等，1988，Mol.Cell?Biol.8：963-973)，人工合成的互補于人免疫缺陷病毒基因的寡核苷酸可以抑制人免疫缺陷病毒的感染復制(Zamecnik等，1986，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，83：4143-4146)。

Bcl-2是Bcl-2蛋白家族的一員，它定位于細胞內的線粒體膜上，阻止線粒體內細胞色素c的釋放，而后者是細胞凋亡的發起者之一。Bcl-2蛋白被認為同腫瘤細胞抵抗細胞凋亡以及腫瘤細胞耐藥性的產生密切相關。