[發明專利]鏈球菌DNA疫苗pcDNA3.1－GapC及其制備方法

無效

• 申請號: 200710041199.2
• 申請日: 2007-05-24
• 公開（公告）號: CN101066464A
• 公開（公告）日: 2007-11-07
• 發明（設計）人: 陳宇光;陳濤;沈彥萍
• 申請（專利權）人: 上海大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;C12N15/31
• 代理公司: 上海上大專利事務所
• 代理人: 何文欣

1.一種鏈球菌DNA疫苗pcDNA3.1-GapC，其特征在于該疫苗具有SEQ?NO?3所示的堿基序列。

2.根據權利要求1所述的鏈球菌DNA疫苗pcDNA3.1-GapC的編碼蛋白，其特征在于具有SEQ?NO?4所示的氨基酸序列。

3.一種根據權利要求1所述的鏈球菌DNA疫苗pcDNA3.1-GapC的制備方法，其特征在于該方法為：根據停乳鏈球菌GapC上下游序列設計引物：

上游引物：5’-GGGGCTAGCACCATGGTAGTTAAAGTTGGTAT-3’

下游引物：5’-GGGGGTACCTCATTATTTAGCGATTTTTGCAA-3’

為了在上游引物中加入真核增強翻譯序列Kozak序列(A/GCCATGG)，在ATG前加入ACC三個堿基.下游引物中加入2個連續的終止密碼子；以停乳鏈球菌基因組DNA為模板，加入上游引物和下游引物進行PCR擴增：94℃變性5min，然后94℃30s，57℃1min，72℃1min，循環30次，72℃復性10min，得到GapC基因；然后用NheI，KpnI雙酶切后，與同樣用NheI，KpnI雙酶切的pcDNA3.1載體連接，構建重組載體pcDNA3.1-GapC。