[發(fā)明專利]從鯊魚皮分離純化生物醫(yī)藥用膠原蛋白的方法有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 200710040590.0 | 申請(qǐng)日: | 2007-05-14 |
| 公開(公告)號(hào): | CN101307093A | 公開(公告)日: | 2008-11-19 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 周培根;繆輝南;吳文惠;何培民;蔡春爾;李燕 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 上海水產(chǎn)大學(xué) |
| 主分類號(hào): | C07K1/16 | 分類號(hào): | C07K1/16;C07K2/00 |
| 代理公司: | 上海智力專利商標(biāo)事務(wù)所 | 代理人: | 瞿承達(dá) |
| 地址: | 200090*** | 國(guó)省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 鯊魚 分離 純化 生物醫(yī)藥 膠原 蛋白 方法 | ||
1.一種從鯊魚皮中分離純化生物醫(yī)學(xué)用膠原蛋白的方法,其特征在 于選取原料為鯊魚皮,制備方法如下:
(1)、將鯊魚皮用濃度為10mM,pH值為7.4-7.6的磷酸氫二鈉緩沖液浸泡 沖洗去掉鱗和殘肉,并切成小塊,再用去離子水浸泡沖洗3~5次;
(2)、清洗干凈的魚皮且用原料量五倍的濃度為100mM,pH值為7.4-7.6 的磷酸氫二鈉緩沖液浸泡70~75小時(shí)后,勻漿15min,在溫度為4℃,轉(zhuǎn)速 為10000rpm,離心15min,取上清液;
(3)、再沉淀重復(fù)(2)的過(guò)程一次,合并上清液,加硫酸銨至飽和度80 %,在溫度為4℃,轉(zhuǎn)速為8000rpm,離心15min,保留沉淀;
(4)、將沉淀溶在濃度為200mM,pH值為7.0的磷酸緩沖液中;
(5)、用G-75,G-100,G-150葡聚糖層析上述溶解液,收集蛋白溶出液 于溫度為4℃,轉(zhuǎn)速為10000rpm,離心15min,上清液濃縮,冷凍干燥后得 到生物醫(yī)學(xué)用膠原蛋白。
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