[發明專利]己烯雌酚的玻碳電極修飾的電化學檢測方法

無效

• 申請號: 200710040472.X
• 申請日: 2007-05-10
• 公開（公告）號: CN101059480A
• 公開（公告）日: 2007-10-24
• 發明（設計）人: 劉國艷;柴春彥
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: G01N27/48
• 分類號: G01N27/48;G01N27/413;G01N27/38;G01N33/74
• 代理公司: 上海交達專利事務所
• 代理人: 王錫麟;張宗明

技術領域

本發明涉及的是一種電化學分析技術領域的檢測方法，特別的是一種己烯雌酚的玻碳電極修飾的電化學檢測方法。

背景技術

己烯雌酚(diethylstilbestrol，(E)-3，4-Bis(4-hydroxyphenyl)-3-hexene，DES)誕生于20世紀40年代，為第一個口服有活性的人工合成雌激素。己烯雌酚在人造雌激素中是作用較強的一種。醫學上主要用于治療雌激素缺乏癥，但是由于其具有促進動物生長、增加蛋白質沉積和提高飼料轉化率的作用，曾經作為促生長劑廣泛應用于畜牧養殖業。己烯雌酚在獸醫臨床上主要用于不明顯發情動物的催情，還可用治療胎衣不下、排出死胎、治療子宮炎等。自從人們發現動物因食用含DES的飼料在組織中殘留給人類健康帶來危害以來，世界上絕大多數國家禁止在食品動物中使用DES。2002年我國農業部規定，DES及其鹽、酯制劑禁用于所有食品動物的所有用途。但在畜牧養殖業上非法添加DES情況不時出現，因而建立快速、靈敏并能實現現場檢測己烯雌酚的方法非常必要。目前國內外文獻報道用于DES殘留檢測的方法很多，主要有免疫學方法：如放射免疫法(RIA)酶聯免疫吸附法(ELISA)等；色譜學方法：如氣相色譜法(GC)、氣相色譜—質譜聯用法(GC-MS)、高效液相色譜法(HPLC)、薄層色譜法(TLC)、氣液色譜法(GLC)等；其它方法：如輻射分光光度法、電化學法，生物分析法等。在這些分析方法中，氣相色譜—質譜聯機法、放射免疫法以及帶電子捕獲檢測器的氣相色譜法是目前已有的最能有效、靈敏地測定DES?ppb水平含量的檢測方法。但這些分析方法均需要大型分析儀器，操作過程繁瑣，不能實現現場檢測。本發明研制的修飾電極可直接用于現場樣品中DES的富積及與便攜式電化學傳感器組裝后進行現場測試。

經對現有技術文獻的檢索發現，Shenghui?Zhang，Kangbing?Wu?and?Shengshui?Hu.Voltammetric?determination?of?diethylstilbestrol?at?carbonpaste?electrode?using?cetrylpyridine?bromide?as?medium.Talanta，2002，58：747-754(張勝輝、吳康斌、胡勝水于2002年，在《國際純粹》58期747頁-754頁，發表的“以溴代十六烷基吡啶為電子媒介體的碳糊電極上檢測己烯雌酚的電化學方法”)。但該方法的缺陷是：由于使用碳糊電極，其重復性不佳，且檢測限較高，為0.00268μg/g，不能滿足檢測動物性產品中己烯殘留最低檢測限的要求。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術中的不足，提供一種己烯雌酚的玻碳電極修飾的電化學檢測方法。本發明的工作電極的修飾過程簡單且能重復利用，該修飾電極對己烯雌酚的選擇性富積能力強，測試的重現性良好及靈敏度高，檢測限可達到0.001μg/g。

本發明是通過以下技術方案實現的，本發明包括如下步驟：

第一步，電極的預處理：將玻碳電極在麂皮上用TiO₂納米粉按“8”字形打磨，使其成鏡面，用蒸餾水沖洗，再用超聲波清洗10分鐘～30分鐘；將清洗后的玻碳電極依次放入體積比為1：1的硝酸、丙酮溶液中各浸泡3分鐘～15分鐘，然后用蒸餾水沖洗電極；將電極在紅外燈下烘干。

第二步，納米金溶膠液的制備；

第三步，聚乙烯亞胺-納米金修飾玻碳電極的制備：可先后分為聚乙烯亞胺修飾玻碳電極的制備與聚乙烯亞胺-納米金修飾電極的制備兩個步驟；

第四步，用聚乙烯亞胺-納米金修飾電極測試己烯雌酚含量：

a.在不同的電化學測試杯中分別加入6毫升～10毫升pH6.8的0.01M的磷酸鹽緩沖液作為支持溶液，然后在每個小燒杯中分別加入100微升～300微升的7％乙醇水溶液配制的己烯雌酚標準液或樣品待測液。(作標準曲線時，使每個燒杯中己烯雌酚的最終濃度分別為0.06mg/L、0.12mg/L、0.3mg/L、0.6mg/L、1.2mg/、2.4mg/L，4.8mg/L、6.0mg/L及9.0mg/L。)