[發明專利]一種含有菊粉外切酶基因序列的基因工程菌株及其用于制備菊粉外切酶的方法有效
| 申請號: | 200710040392.4 | 申請日: | 2007-04-30 |
| 公開(公告)號: | CN101063089A | 公開(公告)日: | 2007-10-31 |
| 發明(設計)人: | 呂紅;李育陽;袁漢英 | 申請(專利權)人: | 復旦大學 |
| 主分類號: | C12N1/19 | 分類號: | C12N1/19;C12N15/56;C12N9/24 |
| 代理公司: | 上海正旦專利代理有限公司 | 代理人: | 姚靜芳 |
| 地址: | 20043*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 含有 菊粉 外切 基因 序列 基因工程 菌株 及其 用于 制備 方法 | ||
1.一種含有菊粉外切酶基因序列的基因工程菌株,其特征是,采用分 子生物學方法將菊粉外切酶基因克隆到真核表達載體pUKDS上獲得 pUKDS-INU,并轉化鷹嘴豆克魯維酵母Y179U,即得。
2.一種制備菊粉外切酶的方法,其特征是,取權利要求1所述的基因 工程菌株在28-32℃條件下發酵2-8天,然后去除菌體,即得;發酵液初始 菌濃度為OD600=0.2-1.6;發酵液pH值為5.5-8.0;發酵液中含有質量體積比 為0.5-2%的酵母粉和質量體積比不低于2%的碳源。
3.如權利要求2所述的方法,其特征是,采用搖瓶發酵方式,發酵時 間為3-4天。
4.如權利要求2所述的方法,其特征是,發酵液pH值為6.0-6.5。
5.如權利要求2所述的方法,其特征是,發酵壓強為常壓。
6.如權利要求2所述的方法,其特征是,發酵液初始菌濃度為 OD600=0.6-0.8。
7.如權利要求2所述的方法,其特征是,碳源為菊粉或者葡萄糖。
8.如權利要求7所述的方法,其特征是,菊粉的濃度為4%-6%的質量體 積比。
9.如權利要求7所述的方法,其特征是,葡萄糖的濃度為2%-4%的質量 體積比。
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