[發(fā)明專利]扶正化瘀植物藥中蟲草菌粉原料指紋圖譜質(zhì)量控制方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710040135.0
• 申請日: 2007-04-27
• 公開（公告）號: CN101293002A
• 公開（公告）日: 2008-10-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡坪;潘一峰
• 申請（專利權(quán)）人: 上?，F(xiàn)代中醫(yī)藥技術(shù)發(fā)展有限公司
• 主分類號: A61K36/068
• 分類號: A61K36/068;A61P15/10;A61P11/00;A61P29/00;G01N30/02;G01N30/86;C12N1/14
• 代理公司: 上海泰能知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所
• 代理人: 黃志達(dá);謝文凱

1.一種扶正化瘀植物藥中蟲草菌粉原料指紋圖譜質(zhì)量檢測方法，包括下列步驟：

(1)提取蟲草菌絲粉

稱取0.100g蟲草菌粉，加入25ml純凈水，超聲提取20-60min，提取液用0.23-0.45μm濾膜過濾，進(jìn)樣；

(2)梯度洗脫流動相

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，水和乙腈為流動相進(jìn)行洗脫，色譜柱為Ace水相柱250*4.6mm，5μm，ACT；線性梯度洗脫：0-30min，0-7％乙腈，流速1.0ml/min；檢測波長261nm；柱溫30℃；進(jìn)樣量10μl；

(3)標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的建立

確立蟲草菌粉HPLC標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜，比較樣品指紋圖譜中所有峰，確定4個(gè)共有峰，選取3個(gè)特征峰，分別為2號峰尿苷，3號峰鳥苷和4號峰腺苷，均經(jīng)對照品對照定性和HPLC/MS鑒定，選取含量較高的腺苷作為指標(biāo)成分；

從十批樣品的HPLC指紋圖譜中按照以下原則選取一批蟲草菌粉藥材的指紋圖譜作為對照指紋圖譜，結(jié)合藥效實(shí)驗(yàn)情況，選取確定療效的蟲草菌絲粉的指紋圖譜，將指紋圖譜和定量測定結(jié)果進(jìn)行對照比較，選取含量在平均值附近的樣品的指紋圖譜，選取特征峰分離較好，峰的保留時(shí)間和峰高適宜、峰型較典型的指紋圖譜，選取基線平穩(wěn)、信噪比好的指紋圖譜；

(4)指紋圖譜的質(zhì)量檢測

a.樣品真?zhèn)蔚蔫b別

3個(gè)特征峰相對保留時(shí)間，2號峰尿苷0.44±0.03、3號峰鳥苷0.68±0.03、4號峰腺苷1.00；

b.樣品質(zhì)量評價(jià)

將樣品的HPLC指紋圖譜與對照指紋圖譜進(jìn)行比較，4個(gè)共有峰計(jì)算得到的相似度應(yīng)不得小于0.9。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的扶正化瘀植物藥中蟲草菌粉原料指紋圖譜質(zhì)量檢測方法，其特征在于：所述步驟(4)在指紋圖譜測定條件確定后，通過對至少三批樣品進(jìn)行測定，計(jì)算相關(guān)參數(shù)，提出高效液相色譜系統(tǒng)的適用參數(shù)條件，腺苷對照品溶液100μg/ml的色譜峰面積重現(xiàn)性RSD不高于3％，保留時(shí)間重現(xiàn)性RSD不高于2％；色譜柱柱效以腺苷的特征峰計(jì)算不少于15,000塊理論塔板數(shù)。