[發(fā)明專利]一種抗人Nogo-66受體蛋白疫苗的制備方法及其應(yīng)用無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 200710039666.8 | 申請日: | 2007-04-19 |
| 公開(公告)號: | CN101288771A | 公開(公告)日: | 2008-10-22 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人: | 陸佩華;于盼盼;黃立東;徐曉明;虞志華;王艷霞;王小飛;劉欣秋;徐亮 | 申請(專利權(quán))人: | 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院 |
| 主分類號: | A61K39/395 | 分類號: | A61K39/395;A61P25/00;C12N15/09;C12N15/12 |
| 代理公司: | 上海翼勝專利商標(biāo)事務(wù)所 | 代理人: | 翟羽 |
| 地址: | 200025上*** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 nogo 66 受體 蛋白 疫苗 制備 方法 及其 應(yīng)用 | ||
1.一種抗人Nogo-66受體蛋白疫苗的制備方法,其步驟如下:
從人神經(jīng)母細(xì)胞瘤(SK-N-SH)cDNA中,經(jīng)PCR擴(kuò)增得到全長hNgR基因,不包含信號肽,所用引物如下:
上游引物:5′-TTGGATCCTGCCCAGGTGCCTGCGTATG;
下游引物:5′-TTAAGCTTCAGCAGGGCCCAAGCACTGTC;
將擴(kuò)增的片段插入至克隆載體pUC19中,經(jīng)測序鑒定正確后再亞克隆至含6個His標(biāo)簽的表達(dá)載體pET28a(+)獲得重組表達(dá)質(zhì)粒pET28a-NgR;
經(jīng)酶切及測序鑒定正確后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至大腸桿菌表達(dá)菌株BL21(DE3)中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)。
2.如權(quán)利要求1所述的制備蛋白疫苗的方法,其特征在于,所獲得的蛋白的核苷酸序列如SEQID?No.1。
3.按照如權(quán)利要求1或2所述的方法制備的抗人Nogo-66受體蛋白疫苗在制備治療或預(yù)防脊髓損傷疾病的藥中的應(yīng)用。
4.按照如權(quán)利要求1或2所述的方法制備的抗人Nogo-66受體蛋白疫苗在制備治療或預(yù)防中樞神經(jīng)損傷疾病的藥中的應(yīng)用。
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