[發明專利]一種純化的高比活的重組巴曲酶

有效

• 申請號: 200710038911.3
• 申請日: 2007-03-30
• 公開（公告）號: CN101275126A
• 公開（公告）日: 2008-10-01
• 發明（設計）人: 黃秀東;陳佩新;潘學工;王強;曹之舫
• 申請（專利權）人: 上海萬興生物制藥有限公司
• 主分類號: C12N9/50
• 分類號: C12N9/50;A61K38/48;A61P7/04;C12N9/74
• 代理公司: 上海專利商標事務所有限公司
• 代理人: 徐迅

1.?一種純化的重組巴曲酶，其特征在于，所述的巴曲酶具有以下特性：

(a)分子量為29-32kDa；

(b)所述重組巴曲酶中至少90％巴曲酶具有正確的6對二硫鍵配對：Cys⁷-Cys¹³⁹，Cys²⁶-Cys⁴²，Cys⁷⁴-Cys²³⁰，Cys¹¹⁸-Cys¹⁸⁴，Cys¹⁵⁰-Cys¹⁶³和Cys1¹⁷⁴-Cys¹⁹⁹；

(c)在SEQ?ID?NO：1中第146位和第225位被N-型糖基化修飾；和

(d)所述巴曲酶的比活性大于等于1500KU/mg蛋白。

2.?如權利要求1所述的巴曲酶，其特征在于，所述重組巴曲酶中至少95％巴曲酶具有正確的6對二硫鍵配對。

3.?如權利要求1所述的巴曲酶，其特征在于，所述巴曲酶中的糖基化是在以下位點Asn¹⁴⁶-Asn¹⁴⁷-Thr¹⁴⁸和Asn²²⁵-Lys²²⁶-Thr²²⁸中的Asn氨基酸殘基中發生N-糖基化修飾。

4.?如權利要求3所述的巴曲酶，其特征在于，其N-型糖基化修飾可使巴曲酶蛋白的分子量在25.6kDa的基礎上增加4000-6000kDa。

5.?如權利要求1所述的巴曲酶，其特征在于，所述巴曲酶的比活性1500-3000KU/mg。

6.?如權利要求1所述的巴曲酶，其特征在于，所述巴曲酶中至少99％具有正確的6對二硫鍵配對。

7.?一種如權利要求1所述的純化的重組的巴曲酶在制備止血藥物中的應用。

8.?一種藥物組合物，其特征在于，它含有權利要求1所述的巴曲酶和藥學上可接受的載體。

9.?如權利要求8所述的藥物組合物，其特征在于，所述的組合物還含有水解明膠作為穩定劑。

10.?如權利要求8所述的組合物，其特征在于，所述的組合物為液體或凍干粉的形式。