[發明專利]基因或核酸序列的酶切－連接長序列半合成方法無效
| 申請號： | 200710038807.4 | 申請日： | 2007-03-30 |
| 公開（公告）號： | CN101275163A | 公開（公告）日： | 2008-10-01 |
| 發明（設計）人： | 赫英俊;肖愛軍;周磊;邵永勝 | 申請（專利權）人： | 上海捷瑞生物工程有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12P19/34;C07H21/04 |
| 代理公司： | 上海智信專利代理有限公司 | 代理人： | 胡美強 |
| 地址： | 200233上*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 基因 核酸 序列 連接 合成 方法 | ||
【權利要求書】：
1.?一種基因或核酸序列的酶切-連接長序列半合成方法，是通過以下步驟實現的：
目標基因或核酸序列分析：對要求合成或獲得的目標序列進行分析，設計分段化學合成的片段長度、分割位點；
目標基因或核酸序列的片段化學合成：根據上述分析的結果，用化學合成法合成目標基因或脫氧核糖核酸序列的片段，在合成時人為引入適當的限制性內切酶識別位點；
目標基因或核酸序列各片段的限制性酶切反應：用能夠識別上述位點的限制性內切酶進行酶切反應，產生含有粘性末端的片段；
目標基因或核酸序列各片段的正確連接：用適當連接酶對分段合成的基因或核酸序列的片段進行常規的酶促連接反應。
2.?根據權利要求1所述的基因或核酸序列的酶切-連接長序列半合成方法，將目標基因或合算序列分為3段進行化學合成，其中有2個擬利用的區段，即NNNNNN/OOOOOO區段和RRRRRR/QQQQQQ區段，其中，N、O、R、Q為任意堿基，但必須符合以下原則：
a)N與O是互補配對堿基，R和Q是互補配對堿基；
b)NNNNNN/OOOOOO區段和RRRRRR/QQQQQQ區段不完全一致。
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