[發明專利]蔓越莓中提取原花青素的方法

無效

• 申請號: 200710037281.8
• 申請日: 2007-02-07
• 公開（公告）號: CN101239962A
• 公開（公告）日: 2008-08-13
• 發明（設計）人: 史彤;高飛
• 申請（專利權）人: 上海華珠生物科技有限公司
• 主分類號: C07D311/62
• 分類號: C07D311/62;C07D311/22
• 代理公司: 上海智信專利代理有限公司
• 代理人: 薛琦

技術領域

本發明涉及一種從蔓越莓中提取原花青素的方法。

背景技術

原花青素(Proanthocyanidins，PACs)是植物王國中廣泛存在的一大類多酚化合物的總稱，起初統歸于縮合鞣質或黃烷醇類，隨著分離鑒定技術的提高和對此類物質的深入研究，現已成為獨樹一幟的一大類物質，并稱之為原花青素。原花青素(PACs)是黃烷-3-醇(flavan-3-ols)或黃烷-3，4-二醇的聚合物，也稱縮合鞣質。即黃烷單體通過C-C鍵和C-O酯鍵連接成的聚合物。在可食用植物中，黃烷單體之間主要通過B型鍵合(B-type?linkage)[C4-C8，和C4-C6]，和A型鍵合(A-type?linkage)[C4-C8和C2-O-C7]方式連接聚合，聚合度可為二聚體、三聚體、直至十聚體以上。原花青素(PAs)已被證實具有多種生物學功能，如抗細菌黏附性、抗氧化性、抗腫瘤性等，具有廣闊的應用前景。

原花青素廣泛存在于天然植物中，如葡萄、沙棘、松樹皮及越橘類植物中。目前報道的原花青素分離提取方法多針對我國產量較高的植物，如葡萄、松樹皮等。其中蔓越莓雖原產于北美，但目前已在我國培育成功，其產業化種植指日可待；另外我國也有其他越橘類植物的天然資源，因此從越橘類植物，尤其是蔓越莓中提取原花青素有廣闊的市場前景。并且越橘類植物中的原花青素由于其獨特的結構，尤其是其所具有的A型鍵合(A-type?linkage)結構，使具有較強的抗黏附作用。但目前針對越橘類植物，尤其是蔓越莓，提取分離原花青素的報道較少，已有的也要經過復雜的分離提取過程。如發明專利(專利號96192723.2)和文獻(Phytochemistry，2005(66)：2281.)所述，前者使用蔓越莓果粉分離原花青素，需經過繁瑣的原料處理過程，二者都需經兩次柱層析，成本高、過程復雜。

發明內容

本發明的目的是提供一種工藝流程簡單、生產成本低且易于產業化的從蔓越莓中提取原花青素的方法。

本發明的方法包括如下步驟：

(1)原料處理，制得蔓越莓提取液。

本發明中，所述的原料可采用蔓越莓果或其他蔓越莓原料品，如商品化的蔓越莓濃縮汁。

當采用蔓越莓果為原料時，可采用的原料處理的步驟為：將蔓越莓果在溶劑中進行研磨，再去除果肉，再蒸干溶劑，將提取物溶于水，即可。

其中，所述的溶劑較佳的為含有丙酮，甲醇和檸檬酸的溶液，較佳的配比為體積百分比70％丙酮、體積百分比30％甲醇，0.1g/100ml檸檬酸；所述的蔓越莓果與溶劑的重量體積比較佳的為2克∶1毫升～5克∶1毫升；所述的研磨的時間較佳的為2～15分鐘；所述的研磨較佳的在4～30℃下進行；所述的去除果肉的方式可為離心后取上清液，或通過篩網過濾。

當采用蔓越莓濃縮汁為原料時，可采用的原料處理的步驟為：將蔓越莓濃縮汁用水稀釋。所述的水的用量較佳的為蔓越莓濃縮汁體積的0.3～3倍。

(2)將蔓越莓提取液進行脫脂處理。

本發明中，所述的脫脂處理的方式可采用常用方法，如熱脫脂、溶劑脫脂及超臨界流體萃取等。較佳的采用溶劑脫脂：在蔓越莓提取液中加入脂溶性有機溶劑進行脫脂處理，之后蒸干，得蔓越莓提取物。

其中，所述的脂溶性有機溶劑較佳的為石油醚；所述的蔓越莓提取液與脂溶性有機溶劑的體積比較佳的為1∶1～1∶3；所述的脫脂處理的時間較佳的為1～3小時，次數較佳的為2～3次。

(3)采用柱層析法進行分離提純，即可。

本發明中，所述的柱層析法較佳的采用凝膠柱層析法，其具體實驗步驟可為：

1)用平衡液將凝膠層析柱平衡。

其中，所述的凝膠層析柱可使用Pharmacia公司的LH-20柱；所述的平衡液較佳的為體積百分比50％的乙醇水溶液；平衡時間較佳的為過夜。

其中，所述的凝膠層析柱中凝膠的使用量較佳的為：當原料采用蔓越莓果時，凝膠與蔓越莓果的重量比為1∶20～1∶50；當原料采用蔓越莓濃縮汁時，凝膠與蔓越莓濃縮汁的體積重量比為1克∶1毫升～1克∶5毫升。

2)將蔓越莓提取物溶于溶劑，上樣。

其中，所述的溶劑較佳的為平衡液。

其中，將蔓越莓提取物溶于溶劑后，較佳的將其充分旋渦振蕩，再上樣。

3)洗滌液洗柱，至洗滌液無色為止。

其中，所述的洗滌液較佳的為體積百分比50％的乙醇水溶液；所述的洗滌液洗柱的流速較佳的為0.5～5毫升/分鐘。

4)洗脫液洗柱，并收集洗脫液，即可。