[發(fā)明專利]一種檢測(cè)圍產(chǎn)期疾病遺傳易感風(fēng)險(xiǎn)的試劑盒

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710037173.0
• 申請(qǐng)日: 2007-02-06
• 公開（公告）號(hào): CN101240323A
• 公開（公告）日: 2008-08-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 馮哲民;鄒祖燁
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 上海主健生物工程有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/68
• 分類號(hào): C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

1.?一種檢測(cè)圍產(chǎn)期疾病遺傳易感風(fēng)險(xiǎn)的試劑盒，其特征在于：包括檢測(cè)血管緊張素轉(zhuǎn)換酶基因(ACE)上rs4646994號(hào)I/D多態(tài)性基因型的電泳檢測(cè)引物對(duì)、檢測(cè)5，10-亞甲基四氫葉酸還原酶基因(MTHFR)上rs1801133號(hào)SNP位點(diǎn)、G蛋白3亞單位基因基因(GNB3)上rs5443號(hào)SNP位點(diǎn)、腫瘤壞死因子基因(TNF-α)上rs1800629號(hào)SNP位點(diǎn)的特異性引物對(duì)及特異性熒光探針對(duì)、Taq酶、dNTP混合液、MgCl₂溶液、熒光定量PCR反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)緩沖液、去離子水等。

2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述的電泳檢測(cè)引物對(duì)是指針對(duì)ACE基因上rs4646994號(hào)I/D而設(shè)計(jì)，能通過(guò)電泳技術(shù)特異性擴(kuò)增檢測(cè)出這個(gè)位點(diǎn)基因型的電泳檢測(cè)引物對(duì)。

3.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述的特異性引物對(duì)是指針對(duì)MTHFR基因上rs1801133號(hào)SNP位點(diǎn)、GNB3基因上rs5443號(hào)SNP位點(diǎn)、TNF-α基因上rs1800629號(hào)SNP位點(diǎn)這3個(gè)SNP位點(diǎn)，能特異性擴(kuò)增出包含這3個(gè)SNP位點(diǎn)的DNA片段的引物對(duì)。

4.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所述的特異性熒光探針對(duì)是指針對(duì)MTHFR基因上rs1801133號(hào)SNP位點(diǎn)、GNB3基因上rs5443號(hào)SNP位點(diǎn)、TNF-α基因上rs1800629號(hào)SNP位點(diǎn)這3個(gè)SNP位點(diǎn)而設(shè)計(jì)，能通過(guò)熒光定量PCR技術(shù)特異性檢測(cè)出這3個(gè)SNP位點(diǎn)基因型的Taqman探針對(duì)。

5.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所含的電泳檢測(cè)引物對(duì)選自具有SEQ?ID?NO：1和2所示序列的引物對(duì)。

6.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所含的特異性引物對(duì)選自具有SEQ?ID?NO：3和4、5和6、7和8所示序列的引物對(duì)。

7.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于：所含的特異性熒光探針選自具有SEQ?ID?NO：9和10、11和12、13和14所示序列的Taqman探針對(duì)。

8.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于試劑盒的組分和含量包括：

1)熒光定量PCR反應(yīng)套裝：10X熒光定量PCR反應(yīng)緩沖液3μl，25mM?dNTP混合液0.3μl，25mM?MgCl2溶液1.8μl，5units/μl?Taq?DNA聚合酶0.75μl，20μM特異性引物對(duì)每條引物各0.225μl，10μM特異性熒光探針對(duì)每條探針各0.25μl，去離子水15.975μl。

2)PCR反應(yīng)套裝：10X?PCR反應(yīng)緩沖液2.5μl，25mM?dNTP混合液0.2μl，25mM?MgCl2溶液1.5μl，5units/μl?Taq?DNA聚合酶0.125μl，20μM特異性引物對(duì)每條引物各0.25μl，去離子水19.175μl。

本試劑盒供一人份檢測(cè)應(yīng)用，試劑盒的保存溫度為-20℃。