[發明專利]一種復合菌種發酵劑及其制備方法

無效

• 申請號: 200710034296.9
• 申請日: 2007-01-18
• 公開（公告）號: CN101225365A
• 公開（公告）日: 2008-07-23
• 發明（設計）人: 馬小明
• 申請（專利權）人: 馬小明
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/16;A23C9/12;A61K35/74;A61K36/064;A61P1/00;A61P3/00;A61P9/12;A61P9/00;C12R1/225;C12R1/23;C12R1/245;C12R1/865
• 代理公司: 南昌佳誠專利事務所
• 代理人: 閔蓉;劉守正

技術領域

本發明屬于生物工程微生物發酵領域，具體涉及一種乳酸菌——酵母菌復合發酵劑及其制備方法。

背景技術

Kefir(開菲爾)起源于高加索山區，它是用開菲爾粒子發酵牛奶而產生的一種乳酸--酒精性發酵飲料，由于其復雜的菌系、特殊的營養作用和保健功能，引起人們對它廣泛的研究，但由于在不使用原粒子的情況下無法生成新粒，因此產業化難于發酵出和粒子發酵產物一致或功能相近的飲料。

發明內容

本發明的目的在于模仿原始開菲爾的特性，用純發酵劑復合和優化培養研制-種復合菌種發酵劑，進而研制開菲爾飲料，該法制成的開菲爾可解決用開菲爾粒子直接發酵難于產業化的問題，并能保持菌種在乳生產中的穩定性。本發明的另一個目的是提供了該復合菌種發酵劑的制備方法。

本發明的目的是這樣實現的：利用公知菌種德氏乳桿菌保加利亞亞種(L.delbrueckiisubsp.bulgaricus)ATCC?No.33409^*，乳酸乳球菌(L.lactis)CGMCC?No.12030，腸膜明串珠菌(L.mesenteroides)CCIC?No.6055，嗜酸乳桿菌(L.acidophilus)ATCC?No.43121，干酪乳桿菌(L.casei)ATCC?No.393，克魯維酵母(Kluyveromyces)CCIC?No.1772和釀酒酵母(saccharomycescerevi)ATCC?No.15248進行高密度培養后真空冷凍干燥，制成直投式單菌發酵劑再以等量細胞數目復合成復合菌種發酵劑。

該復合菌種發酵劑的制備方法如下：1、首先，對菌種德氏乳桿菌保加利亞亞種、乳酸乳球菌、腸膜明串珠菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、克魯維酵母和酒香酵母，進行高密度培養，方法和步驟如下。

各菌以3～5％培養基的量接種到優化培養基中，全自動發酵罐培養，流加無菌30％Na₂CO₃溶液控制發酵過程中的pH值，培養3～6小時后添加培養基量的0.1～20％增殖因子，培養3～6小時后流加相同體積的優化培養基繼續培養，繼續培養4～10小時后收集發酵液。2、其次對各菌種培養基再分別發酵。①德氏乳桿菌保加利亞亞種：以12％脫脂奶+蛋白水解酶為優化培養基，以3～5％麥芽汁+3～5％酵母粉+5～10％番茄汁為增殖因子，增殖因子添加量為培養基的10～20％，控制pH值為6.5，在半連續培養裝置中30℃連續培養16～24小時，攪拌速度是200～250rpm，不通氣發酵。

②乳酸乳球菌：以12％脫脂奶+蛋白水解酶為優化培養基，以5～10％麥芽汁+1～3％酵母粉+15～20mg/L?Vc為增殖因子，增殖因子添加量為培養基的10～20％，控制pH值為6.0，在半連續培養裝置中32℃連續培養16～24小時，攪拌速度是200～250rpm，不通氣發酵。

③腸膜明串珠菌：以蛋白胨0.5％+酵母膏0.5％+葡萄糖1％+檸檬酸鈉0.15％+磷酸二氫鉀0.1％為優化培養基，以0.005～0.11％Mg²⁺+0.005～0.01％Mn²⁺+3～5％酵母粉為增殖因子，增殖因子添加量為培養基的5～10％，控制pH值為6.5，在半連續培養裝置中32℃連續培養16～24小時，攪拌速度200～250rpm，通氣量為1～2vol/vol/min。

④嗜酸乳桿菌：以12％脫脂奶+蛋白水解酶為優化培養基，以3～5％麥芽汁+3～5％酵母粉+15～20％番茄汁為增殖因子，增殖因子添加量為培養基的10～20％，控制pH值為6.5，在半連續培養裝置中35℃連續培養12～14小時，攪拌速度200～250rpm，通氣量為1～2vol/vol/min發酵。

⑤干酪乳桿菌：以12％脫脂奶+蛋白水解酶為優化培養基，以5～10％麥芽汁+2～3％酵母粉+5～15％番茄汁為增殖因子，增殖因子添加量為培養基的10～20％，pH值為6.5，在半連續培養裝置中30℃連續培養16-24小時，攪拌速度200～250rpm，不通氣發酵。