[發(fā)明專利]雙口山酮化合物Secalonic acid A及其制備方法與制備神經(jīng)元細胞保護藥物中的應用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 200710032992.6
• 申請日: 2007-12-29
• 公開（公告）號: CN101215283A
• 公開（公告）日: 2008-07-09
• 發(fā)明（設計）人: 林永成;陳汝筑;佘志剛;朱小南;張奕;翟愛峰;蔡小玲;王煥章;魯厲
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: C07D407/04
• 分類號: C07D407/04;C12P17/06;A61K31/352;A61P25/28;A61P9/10;C12R1/645
• 代理公司: 廣州粵高專利代理有限公司
• 代理人: 陳衛(wèi)

技術領域

本發(fā)明涉及藥物化合物領域，具體涉及一類源于真菌的具有保護神經(jīng)元細胞活性的雙口山酮化合物Secalonic?acid?A的制備方法以及在神經(jīng)元細胞保護中的應用。

背景技術

就尋找新化合物和新抗生素藥物而言，在經(jīng)過半個世紀每年數(shù)十億美元的投入的全球性篩選后，目前從陸源微生物發(fā)現(xiàn)新化合物的幾率已大大降低，分離所得的化合物有90％以上是前人鑒定過的。而另一方面，海洋微生物研究傳來了令人們興奮的發(fā)現(xiàn)，研究人員已從海洋微生物中分離出眾多的新化合物，有些結構類型以前從未在陸生生物中發(fā)現(xiàn)過，在得到的化合物中新結構物質比例遠高于陸生生物所得，由于海洋環(huán)境的特殊性，海洋微生物種類繁多，來源廣泛，篩選獲得率高，海洋微生物成了又一個吸引人的天然藥物寶庫。

2006年，John教授等在《Natural?Product?Reports》的“海洋天然產物”的綜述中報道，2004年報道的海洋天然產物768個化合物(716個新化合物，其中有380個化合物有藥理活性，占55％)中，海洋微生物(包括海洋真菌)是主要來源之一(另外包括海綿和腔腸動物)。2004年的海洋天然產物的研究成果進一步證明，海洋真菌是研究和增加新穎化合物的熱點。到目前為止，已從海洋真菌中發(fā)現(xiàn)大量新型抗生素、抗癌、抗病毒、抗菌、抗其它重大疾病等的生物活性物質。

Talaromyces?sp.是海洋真菌的一種，二十世紀五十年代首次被發(fā)現(xiàn)，能產生豐富的代謝產物，而海洋真菌Talaromyces?sp?SBE-14來自香港紅樹林植物，是一種典型的內源性真菌。

發(fā)明內容

本發(fā)明的目的在于提供一類新的來源于海洋真菌的具有潛在藥用價值的雙口山酮化合物Secalonic?acid?A。

本發(fā)明的另一個目的是提供上述化合物Secalonic?acid?A的制備方法。

本發(fā)明的進一步目的是提供上述化合物Secalonic?acid?A化合物在制備神經(jīng)元細胞保護藥物中的應用。

發(fā)明人由南海海洋真菌Talaromyces?sp?SBE-14的發(fā)酵培養(yǎng)物中提取分離得到化合物Secalonic?acid?A，該化合物的結構如下：

本發(fā)明所用的真菌Talaromyces?sp?SBE-14已保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心(CCTCC，中國武漢大學校內)，保藏號為M?207195，保藏日為2007年12月10日。

本發(fā)明雙口山酮化合物Secalonic?acid?A可從真菌Talaromyces?spSBE-14的發(fā)酵培養(yǎng)液和菌體中提取分離得到，制備方法的具體步驟如下：

a.南海海洋真菌Talaromyces?sp?SBE-14的種子培養(yǎng)：培養(yǎng)基按重量比為：葡萄糖0.1-1.5，酵母提取物0.01-0.15，蛋白胨0.005-0.3，瓊脂0.5-1.5，氯化鈉0.1-2.5，水100；制成試管斜面，挑取菌株接入斜面，30-35℃培養(yǎng)5-7天；

b.南海海洋真菌Talaromyces?sp?SBE-14的發(fā)酵培養(yǎng)：發(fā)酵培養(yǎng)基按重量比為：葡萄糖5-15，酵母提取物1-4，蛋白胨0.5-4，氯化鈉3-5，水100；將斜面中培養(yǎng)好的菌株挑入發(fā)酵培養(yǎng)基，于室溫25-35℃靜置1-2個月；

c.將上述培養(yǎng)好的發(fā)酵液過濾得到菌體和培養(yǎng)液；菌體和培養(yǎng)液分別處理；

d.在溫度不超過50℃條件下，將培養(yǎng)液加熱濃縮至原液體積的1/20-1/5，用乙酸乙酯萃取多次，濃縮乙酸乙酯萃取液，在硅膠柱中進行色譜分離，以石油醚-乙酸乙酯-甲醇為洗脫劑梯度洗脫；

e.培養(yǎng)液浸膏經(jīng)過柱層析后，收集50％～100％的乙酸乙酯/甲醇洗脫液，70％的乙酸乙酯/甲醇為洗脫液，再以丙酮進行重結晶純化，即得到黃色針狀結晶Secalonic?acid?A；

f.將菌體風干，用甲醇浸泡，提取液濃縮成浸膏，在硅膠柱中進行色譜分離，以石油醚-乙酸乙酯-甲醇為洗脫劑梯度洗脫，收集50％～100％的乙酸乙酯/甲醇洗脫液，70％的乙酸乙酯/甲醇為洗脫液，再以丙酮進行重結晶純化，即得到黃色針狀結晶Secalonic?acid?A。

本發(fā)明經(jīng)試驗證明，雙口山酮化合物Secalonic?acid?A，能有效抑制神經(jīng)元細胞的凋亡，能用于開發(fā)神經(jīng)元保護藥物，如中樞慢性神經(jīng)退行性疾病或腦缺血疾病的治療藥物。