[發明專利]一種米糠免疫肽及其制備方法

有效

• 申請號: 200710032822.8
• 申請日: 2007-12-25
• 公開（公告）號: CN101210043A
• 公開（公告）日: 2008-07-02
• 發明（設計）人: 張名位;張雁;池建偉;魏振承;唐小俊;張瑞芬;李健雄
• 申請（專利權）人: 廣東省農業科學院農業生物技術研究所
• 主分類號: C07K2/00
• 分類號: C07K2/00;C12P21/06;C07K1/14
• 代理公司: 廣州知友專利商標代理有限公司
• 代理人: 宣國華

技術領域

本發明涉及一種米糠肽及其制備方法，尤其是涉及一種具有免疫調節活性的米糠肽及其制備方法。????

背景技術

米糠是我國第一大糧食品種——稻谷加工的副產品，米糠肽是米糠蛋白經酶水解獲得的短肽混合物，其氨基酸組成與大豆蛋白質基本相同，必須氨基酸平衡良好，含量豐富。且易為人體消化，安全無毒，是一種優良的腸道營養液。目前已發現米糠肽具有抗氧化、降血壓、降膽固醇、降血糖、免疫、抗疲勞、抗癌等生理活性。然而目前大部分米糠仍用作動物飼料，資源浪費嚴重，同時免疫米糠肽的研究方面比較薄弱，國內外的研究報導也比較零散。因此，以米糠為原料制備米糠免疫肽，對于提高米糠附加值具有重要現實意義。

目前，短肽類物質的生產主要有三種方法：一、基因工程方法，二、化學合成方法，三、酶解法。采用基因工程方法和化學合成方法生產免疫活性肽需要較昂貴的儀器設備，投資大，成本高，且其安全性還需進一步檢測，而用酶解法生產免疫活性肽則具有較多的優勢。現有的酶解法通常采用木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶等植物蛋白酶制備短肽類物質，盡管原料豐富，生產簡單但是酶解效率較低、容易失活，且得到短肽產品具有明顯的苦味。

發明內容

本發明的目的是提供一種具有免疫調節活性的米糠免疫肽。

本發明的另一個目的在于提供具有免疫調節活性的米糠免疫肽的制備方法。

本發明的第一個目的可通過以下的技術措施來實現：一種具有免疫調節活性的米糠免疫肽，采用低堿法提取米糠蛋白、再以胰蛋白酶水解米糠蛋白后制得。

本發明的第一個目的可通過以下的技術措施來實現：一種具有免疫調節活性米糠免疫肽的制備方法，以全脂米糠為原料，先用低堿法提取米糠蛋白，再以胰蛋白酶水解米糠蛋白，獲得米糠肽。

本發明所述低堿法提取米糠蛋白的具體過程：

A、以全脂米糠為原料，加入其8～12倍重量的水，以0.5～1.5mol/l的氫氧化鈉溶液調節其pH值為9～11，置于35～45℃水浴提取110～135min，完成后置離心機中分離，收集上清液；

B、以0.1～0.2mol/l的鹽酸溶液調節收集上清液的pH值為4～5，靜置，蛋白質析出完全后，置離心機中離心分離上清液，傾去上清液，得到米糠蛋白沉淀，于真空冷凍干燥機中干燥，得到米糠蛋白粉，其米糠蛋白提取率可達到80％以上。

本發明所述以胰蛋白酶水解米糠蛋白的具體過程：

C、將上述米糠蛋白粉加水配制成3～7％(重量百分比)的混合物，以0.5～1.5mol/l的氫氧化鈉溶液調節其pH值為7.5～9；

D、按照60～120USP-U/g的用量加入胰蛋白酶，置于45～60℃水浴中酶解1.5～3hr，完成后加熱至100℃維持10～15min進行滅酶活，冷卻至室溫后置于離心機中分離取上清液，真空濃縮后置于真空冷凍干燥機中干燥，得到米糠免疫肽。

本發明與現有技術相比具有以下優點：

1、在米糠蛋白的提取工藝方面，為了提高提取率，現有的工藝通常采用強堿性條件，其浸提液pH值≥12，但上述強堿性條件對米糠蛋白的溶解性、乳化性、起泡性等功能特性會產生不良影響，并降低其酶解制備米糠肽的效率。本發明控制提取條件pH≤11，溫度≤45℃，使得米糠蛋白的功能性質基本不受影響，并可提高其酶解制備米糠肽的效率，由于具有免疫活性肽的分子量多在1900Da以下，對水解效率要求較高，因此，本發明采用低堿法提取米糠蛋白、以動物蛋白酶水解米糠蛋白制備米糠肽，得到的米糠肽產品不僅無苦味、風味好，并具有免疫調節活性。

2、在米糠肽的制備工藝方面，為了降低生產成本，現有的工藝通常采用價格較低的木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶等植物蛋白酶，其水解效率不高，不容易得到具有免疫活性的米糠肽。本發明采用動物蛋白酶胰蛋白酶對上述米糠蛋白進行酶解，米糠蛋白原有的許多功能性質，如乳化功能、起泡功能、吸水功能、增稠功能、粘著功能、營養價值、生理功能等均有了不同程度的改善，能夠更好的滿足食品工業及相關行業的需要。

本發明制備得到的米糠肽的免疫活性評價見下表

附表1米糠肽對小鼠脾淋巴細胞增殖的影響(n＝8)