[發(fā)明專利]一種米糠免疫肽及其制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 200710032822.8
• 申請(qǐng)日: 2007-12-25
• 公開（公告）號(hào): CN101210043A
• 公開（公告）日: 2008-07-02
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張名位;張雁;池建偉;魏振承;唐小俊;張瑞芬;李健雄
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究所
• 主分類號(hào): C07K2/00
• 分類號(hào): C07K2/00;C12P21/06;C07K1/14
• 代理公司: 廣州知友專利商標(biāo)代理有限公司
• 代理人: 宣國華

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種米糠肽及其制備方法，尤其是涉及一種具有免疫調(diào)節(jié)活性的米糠肽及其制備方法。????

背景技術(shù)

米糠是我國第一大糧食品種——稻谷加工的副產(chǎn)品，米糠肽是米糠蛋白經(jīng)酶水解獲得的短肽混合物，其氨基酸組成與大豆蛋白質(zhì)基本相同，必須氨基酸平衡良好，含量豐富。且易為人體消化，安全無毒，是一種優(yōu)良的腸道營(yíng)養(yǎng)液。目前已發(fā)現(xiàn)米糠肽具有抗氧化、降血壓、降膽固醇、降血糖、免疫、抗疲勞、抗癌等生理活性。然而目前大部分米糠仍用作動(dòng)物飼料，資源浪費(fèi)嚴(yán)重，同時(shí)免疫米糠肽的研究方面比較薄弱，國內(nèi)外的研究報(bào)導(dǎo)也比較零散。因此，以米糠為原料制備米糠免疫肽，對(duì)于提高米糠附加值具有重要現(xiàn)實(shí)意義。

目前，短肽類物質(zhì)的生產(chǎn)主要有三種方法：一、基因工程方法，二、化學(xué)合成方法，三、酶解法。采用基因工程方法和化學(xué)合成方法生產(chǎn)免疫活性肽需要較昂貴的儀器設(shè)備，投資大，成本高，且其安全性還需進(jìn)一步檢測(cè)，而用酶解法生產(chǎn)免疫活性肽則具有較多的優(yōu)勢(shì)。現(xiàn)有的酶解法通常采用木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶等植物蛋白酶制備短肽類物質(zhì)，盡管原料豐富，生產(chǎn)簡(jiǎn)單但是酶解效率較低、容易失活，且得到短肽產(chǎn)品具有明顯的苦味。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種具有免疫調(diào)節(jié)活性的米糠免疫肽。

本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供具有免疫調(diào)節(jié)活性的米糠免疫肽的制備方法。

本發(fā)明的第一個(gè)目的可通過以下的技術(shù)措施來實(shí)現(xiàn)：一種具有免疫調(diào)節(jié)活性的米糠免疫肽，采用低堿法提取米糠蛋白、再以胰蛋白酶水解米糠蛋白后制得。

本發(fā)明的第一個(gè)目的可通過以下的技術(shù)措施來實(shí)現(xiàn)：一種具有免疫調(diào)節(jié)活性米糠免疫肽的制備方法，以全脂米糠為原料，先用低堿法提取米糠蛋白，再以胰蛋白酶水解米糠蛋白，獲得米糠肽。

本發(fā)明所述低堿法提取米糠蛋白的具體過程：

A、以全脂米糠為原料，加入其8～12倍重量的水，以0.5～1.5mol/l的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)其pH值為9～11，置于35～45℃水浴提取110～135min，完成后置離心機(jī)中分離，收集上清液；

B、以0.1～0.2mol/l的鹽酸溶液調(diào)節(jié)收集上清液的pH值為4～5，靜置，蛋白質(zhì)析出完全后，置離心機(jī)中離心分離上清液，傾去上清液，得到米糠蛋白沉淀，于真空冷凍干燥機(jī)中干燥，得到米糠蛋白粉，其米糠蛋白提取率可達(dá)到80％以上。

本發(fā)明所述以胰蛋白酶水解米糠蛋白的具體過程：

C、將上述米糠蛋白粉加水配制成3～7％(重量百分比)的混合物，以0.5～1.5mol/l的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)其pH值為7.5～9；

D、按照60～120USP-U/g的用量加入胰蛋白酶，置于45～60℃水浴中酶解1.5～3hr，完成后加熱至100℃維持10～15min進(jìn)行滅酶活，冷卻至室溫后置于離心機(jī)中分離取上清液，真空濃縮后置于真空冷凍干燥機(jī)中干燥，得到米糠免疫肽。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有以下優(yōu)點(diǎn)：

1、在米糠蛋白的提取工藝方面，為了提高提取率，現(xiàn)有的工藝通常采用強(qiáng)堿性條件，其浸提液pH值≥12，但上述強(qiáng)堿性條件對(duì)米糠蛋白的溶解性、乳化性、起泡性等功能特性會(huì)產(chǎn)生不良影響，并降低其酶解制備米糠肽的效率。本發(fā)明控制提取條件pH≤11，溫度≤45℃，使得米糠蛋白的功能性質(zhì)基本不受影響，并可提高其酶解制備米糠肽的效率，由于具有免疫活性肽的分子量多在1900Da以下，對(duì)水解效率要求較高，因此，本發(fā)明采用低堿法提取米糠蛋白、以動(dòng)物蛋白酶水解米糠蛋白制備米糠肽，得到的米糠肽產(chǎn)品不僅無苦味、風(fēng)味好，并具有免疫調(diào)節(jié)活性。

2、在米糠肽的制備工藝方面，為了降低生產(chǎn)成本，現(xiàn)有的工藝通常采用價(jià)格較低的木瓜蛋白酶、菠蘿蛋白酶等植物蛋白酶，其水解效率不高，不容易得到具有免疫活性的米糠肽。本發(fā)明采用動(dòng)物蛋白酶胰蛋白酶對(duì)上述米糠蛋白進(jìn)行酶解，米糠蛋白原有的許多功能性質(zhì)，如乳化功能、起泡功能、吸水功能、增稠功能、粘著功能、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值、生理功能等均有了不同程度的改善，能夠更好的滿足食品工業(yè)及相關(guān)行業(yè)的需要。

本發(fā)明制備得到的米糠肽的免疫活性評(píng)價(jià)見下表

附表1米糠肽對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的影響(n＝8)