[發明專利]單葉省藤無性系組培快繁方法

無效

• 申請號: 200710031781.0
• 申請日: 2007-11-28
• 公開（公告）號: CN101167441A
• 公開（公告）日: 2008-04-30
• 發明（設計）人: 曾炳山;尹光天;李湘陽;劉英;裘珍飛
• 申請（專利權）人: 中國林業科學研究院熱帶林業研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00;C12N5/04
• 代理公司: 廣州廣信知識產權代理有限公司
• 代理人: 張文雄

技術領域

本發明涉及一種單葉省藤無性系組培快繁方法，適用于棕櫚科省藤屬植物組培快繁。屬于無性系植物組培技術領域。

背景技術

單葉省藤(Calamus?simplicifolius?Wei.)是棕櫚科(Palmae)省藤亞科(Calamoideae)省藤族(Calameae)省藤屬(Calamus)的具刺、攀緣、叢生藤本植物，是華南熱帶、南亞熱帶地區森林特有的伴生植物。藤莖具有良好的工藝特性，是制作家具和工藝品的優良原料。藤嫩梢富含人體所需的多種營養成分，可做蔬菜食用。種子質地堅硬，是制作“佛珠”的傳統材料。因此，單葉省藤是具有較高經濟價值和開發前景的多用途珍貴森林植物，也是華南地區廣泛栽培的主要商品藤種。目前，海南、廣東、廣西、福建等省區已大面積栽培單葉省藤。

現有技術中，單葉省藤主要采用種子繁殖，有關種子貯藏、播種、容器育苗、苗木病蟲害的防治等均有詳細的研究報道，育苗技術已成功用于造林苗木的培育。但是，單葉省藤種子在常規室溫條件下不耐貯藏，即使在恒溫(15℃)、恒濕(介質含水率保持在50％～65％)的最佳貯藏條件下貯藏六個月，發芽率也僅能維持在65％左右。單葉省藤的最適采種季節為每年的10月份～12月份，由于該季節濕度小，室溫條件下種子容易失水，從而迅速失去發芽能力，給種子繁殖增加了新的難度。

而且，種子繁殖只能繁殖常規苗木，不能繁殖無性系苗木。由于單葉省藤為異花授粉植物，且馴化程度不高，所以天然林和現有人工林中的單葉省藤的雜合程度高，種子繁殖的苗木造林后，在生長、萌蘗、材性等方面分化大，既不利于平均產量的提高，也不利于藤林的集約化經營和藤條采收與銷售。

由于林木基因組雜合程度高，實生苗造林分化大，林木育種通常是走無性系育種的道路，即從育種群體中選出優樹，然后通過無性繁殖的方法繁殖良種?，F有只能以種胚為外植體的組培技術尚無法滿足無性系育種和無性系推廣的要求。如果不解決單葉省藤無性系組培快繁的技術問題，將嚴重制約單葉省藤無性系育種、良種的中試和良種的推廣。

上世紀九十年代開始，中國林業科學研究院熱帶林業研究所開始研究單葉省藤的組培快繁技術。但棕櫚科植物組培技術研究難度大，經過兩個五年計劃的研究，也只能以種胚作外植體才能組培快繁成功，而用頂芽、萌蘗芽、根、葉等無性器官做外植體，則不能組培快繁成功。因而，原有的藤組培技術僅局限于種苗繁殖，即通過組織培養工廠化快繁苗木，但仍然不能繁殖無性系苗木。由于原有組培技術以種胚做外植體，繁殖材料的遺傳基礎無法完全控制，繁殖的苗木與種子繁殖的苗木相比沒有品質差別，但組培繁育苗木的成本比種子繁育苗木要高，難以與種子繁育的苗木在市場上競爭，因而原有以種胚外植體的組培技術的應用前景不大。

發明內容

本發明的目的，是為了克服種子繁殖的苗木造林后，在生長、萌蘗、材性等方面分化大的缺點，提供一種單葉省藤無性系組培快繁方法。

本發明的目的可以通過采取如下措施達到：

一種單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是：利用單葉省藤萌蘗芽等無性器官進行組培快繁，具體步驟如下：

1)采集萌蘗芽外植體

在連續晴天3～5天后用鋸將萌蘗芽從母株上鋸下來；在鋸萌蘗芽外植體的過程中，必須防止芽體外傷和芽心震裂；

2)外植體的消毒

采用兩次消毒法，第一步，首先將外植體清洗干凈，剝去2～3層葉鞘，用75％酒精消毒20～25秒，然后用0.1％氯化汞消毒10～12分鐘，用無菌水漂洗1次10分鐘；第二步，再剝去1～2層葉鞘并修剪至3～4cm長，用0.1％氯化汞消毒1～2分鐘，再用無菌水漂洗3次，第人分別為5分鐘，5分鐘，10分鐘；

3)防止褐變

采用半光氨酸或抗壞血酸或者二者結合對萌蘗芽外植體萌蘗芽外植體進行抗褐變處理，半光氨酸和抗壞血酸的濃度分別為3mg/l和10mg/l；

4)叢芽誘導與增殖培養

外植體采集并消毒后，首先在叢芽誘導培養基上誘導形成叢芽，誘導周期為3～5個月，中途需要轉接與更換新鮮培養基2～3次；形成叢芽后，轉接到增殖培養基上進行增殖培養，一次增殖培養的周期為45～50天；將大的叢芽切分成3～4個芽組成的小芽叢，轉接到新鮮增殖培養基上進行下一次增殖培養，經過多次增殖培養即可將無性系苗木擴繁。

5)生根培養