[發明專利]單葉省藤無性系組培快繁方法

無效

• 申請號: 200710031781.0
• 申請日: 2007-11-28
• 公開（公告）號: CN101167441A
• 公開（公告）日: 2008-04-30
• 發明（設計）人: 曾炳山;尹光天;李湘陽;劉英;裘珍飛
• 申請（專利權）人: 中國林業科學研究院熱帶林業研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00;A01G31/00;C12N5/04
• 代理公司: 廣州廣信知識產權代理有限公司
• 代理人: 張文雄

1.單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是：利用單葉省藤萌蘗芽等無性器官進行組培快繁，具體步驟如下：

1)采集萌蘗芽外植體，在晴天時用鋸將萌蘗芽從母株上鋸下來；在鋸萌蘗芽外植體的過程中，必須防止芽體外傷和芽心震裂；

2)外植體的消毒，采用兩次消毒法，第一步，首先將外植體清洗干凈，剝去外層葉鞘，用75％酒精消毒，然后用0.1％氯化汞消毒，再用無菌水漂洗；第二步，再剝去中層葉鞘并修剪至合適的長度，用0.1％氯化汞消毒，再用無菌水漂洗若干次；

3)防止褐變，采用半光氨酸或抗壞血酸或者二者結合對萌蘗芽外植體萌蘗芽外植體進行抗褐變處理，半光氨酸和抗壞血酸的濃度分別為3mg/l和10mg/l；

4)叢芽誘導與增殖培養，外植體采集并消毒后，首先在叢芽誘導培養基上誘導形成叢芽，誘導周期為3～5個月，中途需要轉接與更換新鮮培養基2～3次；形成叢芽后，轉接到增殖培養基上進行增殖培養，一次增殖培養的周期為45～50天；將大的叢芽切分成3～4個芽組成的小芽叢，轉接到新鮮增殖培養基上進行下一次增殖培養，經過多次增殖培養即可將無性系苗木擴繁。

5)生根培養，對高度達到要求的芽苗在生根培養基進行生根培養，第一次生根培養的時間可以為50～60天；對經過第一次生根培養后還未生根的芽苗，除去1～2層外層葉鞘和對基部進行修剪后，進行第二次生根培養；對高度未達到要求的芽苗，先進行壯苗培養，讓芽苗生長至高度達到要求后，再進行生根培養；

6)田間移植，將生根培養后高度大于或等于8.0cm、根長度大于或等于4.0cm、具有至少3片葉片的苗木進行田間移植；進行田間移植的介質可以為細沙、泥炭土和黃心土，或者將細沙、泥炭土和黃心土按1∶1∶2的比例混合，作為單葉省藤組培苗的移植介質；移植介質以1/1000的高錳酸鉀溶液消毒，移植后每個星期用滅菌劑噴施，防止雜菌滋生；移植后若干天開始每1周施肥一次，移植后即需要遮陰，一直管理到苗木出圃造林。

2.如權利要求1所述的單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是：第1)步采集萌蘗芽外植的高度可以為25～45cm；剝去外層2～3層葉鞘，用75％酒精消毒20～25秒，然后用0.1％氯化汞消毒10～12分鐘，再用無菌水漂洗1次10分鐘；第二步，再剝去1～2層葉鞘并修剪至合適的長度3～4cm長，用0.1％氯化汞消毒1～2分鐘，再用無菌水漂洗若干次1～3次，各次分別為5分鐘，5分鐘，10分鐘；第2)所用的汞濃度為0.1％升。

3.如權利要求1所述的單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是：在第4)步叢芽誘導與增殖培養之后，當芽苗生長不到生根所需要的3.0cm高時，先在壯苗培養基進行壯苗培養，讓芽苗生長到適合生根培養的高度。

4.如權利要求1所述的單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是：在進行第4)步叢芽誘導時，將芽傾斜或平放，使之整體接觸培養基，以促進芽的生長，促進二級蘗芽的萌發，促進增殖。

5.如權利要求1所述的單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是：在進行第5)步生根培養時，將芽苗高度和大小接近的2～4個芽切分在同一小芽叢，轉接到生根培養基上進行生根培養，移植后即可培育成叢芽苗；高度達到要求指大于或等于3.0cm，進行第二次生根培養，對高度未達到要求指小于3.0cm的芽苗，高度達到要求指大于或等于3.0cm高度的芽苗。

6.如權利要求1所述的單葉省藤無性系組培快繁方法，其特征是：第6)田間移植，移植后15天后開始施肥，采用1/1000的復合肥溶液每1周噴施一次、移植后1～7天，95％的遮蔭網遮蔭，8～30天，85％的遮蔭網遮蔭，31～60天，70％的遮蔭網遮蔭，隨后采用50％遮蔭網遮蔭開始遮陰。